铁屎米-6-酮衍生物及其制备方法和用图
[0186] 实施例23铁屎米-6-酮衍生物对A549、HepG2肿瘤细胞的细胞毒性研究
[0187] a、实验细胞
[0188] A549细胞(肺癌细胞）、HepG2细胞(肝癌细胞）（购自中国科学院上海生物化学与细 胞生物学研究所）。
[0189] b、试剂、药物
[0190] 胎牛血清(FBS)，购自浙江天杭生物科技有限公司，批号：140329。
[0191 ] DMEM培养基，购自赛默飞世尔生物化学制品有限公司，批号:NAF1401。
[0192] 10%FBS 的 DMEM 配制方法：取 10mL 的 FBS 加入 90mL 的 DMEM，得到 10%FBS 的 DMEM。
[0193] 藤黄酸溶液的配制方法:先将藤黄酸溶于DMS0配制得到50mM的藤黄酸溶液，再取 10yL50mM的藤黄酸溶液，加入990yL DMEM得到500μΜ的藤黄酸溶液，再取20yL的500μΜ的藤 黄酸溶液，加入380yL DMEM得到25μΜ的藤黄酸溶液。
[0194] 铁屎米-6-酮衍生物的配置方法:先将铁屎米-6-酮衍生物溶于DMS0配制得到50mM 的铁屎米-6-酮衍生物溶液，再取10yL50mM的铁屎米-6-酮衍生物溶液，加入990yLDMEM得到 500μΜ的铁屎米-6-酮衍生物溶液，再取20μL500μΜ的铁屎米-6-酮衍生物溶液，加入380yL DMEM得到25μΜ的铁屎米-6-酮衍生物溶液。
[0195] c、细胞培养和给药
[0196] Α549细胞、HepG2细胞在湿度为95 %、C02浓度为5 %的空气中，37 °C环境下进行培 养，培养液为10 %FBS的DMEM。当培养瓶中的细胞长满后，细胞以1.5 X104个/孔接种在96孔 板上，12h后，正常组加100yL DMEM，对照组用25μΜ藤黄酸溶液，给药组加 100μΙ 25μΜ的不同 铁屎米-6-酮衍生物溶液，孵育48h。
[0197] d、细胞活力检测
[0198] 细胞活力通过MTT比色法来进行定量检测。在药物作用结束后给药组、对照组和正 常组分别加入MTT溶液(终浓度0.5mg/ml)，37°C下培养4小时。然后吸掉上清液，细胞内的甲 馈用100yL DMS0进行溶解。每孔的吸光度用1500酶标仪(Thermo Fisher Scientific Co.) 在570nm波长下进行检测。分别计算不同衍生物对细胞的抑制率，结果见表1。
[0199] 细胞抑制率=1-(测试组0D值-空白组0D值)/(正常组0D值-空白组0D值）X 100%， 其中测试组指给药组或对照组，正常组的细胞存活率为100%。
[0200] 表1铁屎米-6-酮衍生物对A549、HepG2细胞抑制率
[0201]
[0203] 注：表示无明显抑制活性
[0204] 表2部分铁屎米-6-酮衍生物对A549、HepG2的IC50值
[0205]
[0206] 对合成的铁屎米-6-酮衍生物的抗肿瘤活性研究实验发现，大部分化合物对肿瘤 细胞均有抑制活性。其中，04~-4、04~-6、04~-10、04118对4549具有显著的抑制活性，0八~-6、CAN-10、CAN-17对HepG2具有显著的抑制活性，是潜在的治疗肿瘤疾病的新化学实体。对 于抗肿瘤药物的研究与开发具有重要意义。
【主权项】
1. 一种铁尿米-6-酬衍生物或其在药学上可接受的盐、水合物，其特征在于所述的铁尿 米-6-酬衍生物如结构式I所示：其中:Ri选自-0R2、-NHR3、-NR4R5、含一个或多个N的杂环基团； 化选自除甲基外的烷基、取代烷基、苯环取代的烷基、环烷基、苯基、取代苯基； 化、R4、Rs分别独立地选自烷基、苯环取代的烷基、苯基、取代苯基。2. 根据权利要求1所述的铁尿米-6-酬衍生物或其在药学上可接受的盐、水合物，其特 征在于R2选自C2-C8烷基、苯环取代的C广C3烷基、C5-C6环烷基、苯基； 化选自Ci-Cs烷基、苯环取代的C1-C3烷基、苯基、面素取代苯基； R4、Rs分别独立地选自Cl-Cs烷基、苯环取代的C1-C3烷基、苯基、面素取代苯基。 含一个或多个N的杂环基团选自W下基团：t为0、1、或2，R6选自氨、径基、簇基、径甲基、Cl-4烷基、Cl-4烷氧基、Cl-4烷氧基取代的Cl-4 烷基； m为0、1、或2，化选自甲基、甲氧基取代的Ci-2烷基； Rs选自选自氨、Cl-4烷基、面素取代苯基取代的C1-C3烷基喀晚基、化晚基；Rio选自Ci-4烷基；P为1或2 ; q为1、2或3，Rii、 R12相同或不同，各自独立选自Η、C1-3烷基； 化选自氨、面素、径基、氨基、硝基、氯基、Cl-4烷基、Cl-3烷氧基。3. 根据权利要求2所述的铁尿米-6-酬衍生物或其在药学上可接受的盐、水合物，其特 征在于R2选自C2-C4烷基;R3选自C1-C4烷基、苯环取代的C1-C3烷基;R4、Rs分别独立地选自Cl- C4烷基；4.根据权利要求3所述的铁尿米-6-酬衍生物或其在药学上可接受的盐、水合物，其特 征在于R2选自C2-C4烷基;R3选自C2-C4烷基、苯环取代的C1-C3烷基;R4、Rs分别独立地选自Cl- 〔3烷基； 含一个或多个N的杂环基团选自W下基团：5. 根据权利要求4所述的铁尿米-6-酬衍生物或其在药学上可接受的盐、水合物，其特 征在于:所述的铁尿米-6-酬衍生物选自：乙氧基甲酯基铁尿米-6-酬，2-异丙氧基甲酯基铁 尿米-6-酬，2-正下氧基甲酯基铁尿米-6-酬，2-乙氨基甲酯基铁尿米-6-酬，2-丙氨基甲酯 基铁尿米-6-酬，2-异丙氨基甲酯基铁尿米-6-酬，2-正下氨基甲酯基铁尿米-6-酬，2-二乙 氨基甲酯基铁尿米-6-酬，2-节氨基甲酯基铁尿米-6-酬，2-吗嘟基甲酯基铁尿米-6-酬，2- 化咯烷基甲酯基铁尿米-6-酬，2-(4-甲基赃嗦基）甲酯基铁尿米-6-酬，2-(4-乙基赃嗦基） 甲酯基铁尿米-6-酬，2-(4-乙氧基甲酯基赃嗦基）甲酯基铁尿米-6-酬，2-(4-(4-甲氧基苯 基)赃嗦基）甲酯基铁尿米-6-酬，2-(4-(2-喀晚基）赃嗦基）甲酯基铁尿米-6-酬，2-(4-(2- 氣苯基)赃嗦基）甲酯基铁尿米-6-酬，2-(4-(2-化晚基)赃嗦基）甲酯基铁尿米-6-酬，2-(4- (4-氯苯基)赃嗦基）甲酯基铁尿米-6-酬，2-(4-(3-氯苄基)赃嗦基）甲酯基铁尿米-6-酬，2- (4-( 3-甲氧基苯基)赃嗦基）甲酯基铁尿米-6-酬。6. 权利要求1所述的铁尿米-6-酬衍生物的制备方法，其特征在于包括：先合成2-簇基 铁尿米-6-酬，在催化剂作用下，2-簇基铁尿米-6-酬与RiX反应对2-簇基铁尿米-6-酬的2位 簇基进行结构修饰得到铁尿米-6-酬衍生物； 其中，2-簇基铁尿米-6-酬的合成方法为：色氨酸为原料与二氯亚讽在甲醇中反应 得到k色氨酸甲醋，心色氨酸甲醋在酸性水溶液中与乙二醒二甲基缩醒反应得到1-二甲氧 基甲基-3-甲氧基幾基-1，2,3,4-4Η-β-巧己嘟，再脱质子得到1-(二甲氧基甲基)-3-甲氧基 幾基-β-巧己嘟，1-(二甲氧基甲基)-3-甲氧基幾基-β-巧己嘟水解得到1-甲醒基-3-甲氧基 幾基-β-巧己嘟，1-甲醒基-3-甲氧基幾基-β-巧己嘟进一步与乙酸酢在化晚溶液中回流反 应的得到2-甲氧基幾基-铁尿米-6-酬，在溫度20°C~30°C下2-甲氧基幾基-铁尿米-6-酬在 碱性溶液水溶液中水解得到2-簇基铁尿米-6-酬； 2-簇基铁尿米-6-酬与RiX反应为：其中:Ri选自-0R2、-饥瓜3、-NR4R5、含一个或多个N的杂环基团，X选自Η; 化选自除甲基外的烷基、取代烷基、苯环取代的烷基、环烷基、苯基、取代苯基； R3、R4、Rs分别独立地选自烷基、苯环取代的烷基、苯基、取代苯基； 当Ri选自0R2时，催化剂为抓C巧邮MAP;当Ri选自-NHR3、-NR4Rs或含一个或多个N的杂环 基团时，催化剂为邸CI和册BT。7. 根据权利要求6所述的铁尿米-6-酬衍生物的制备方法，其特征在于所述的酸性水溶 液为pH2~3的无机酸水溶液;所述的碱性溶液水溶液为抑10~12的无机碱水溶液。8. 根据权利要求6所述的铁尿米-6-酬衍生物的制备方法，其特征在于2-簇基铁尿米- 6-酬与R戍的反应溫度为20~30°C ; 所述的化X与2-簇基铁尿米-6-酬的摩尔比为1~1.2:1; 所述的邸CI与2-簇基铁尿米-6-酬的摩尔比为1~1.2:1;所述的DMAP的用量为催化量； 所述的册BT与2-簇基铁尿米-6-酬的摩尔比为1~1.2:1。9. 根据权利要求6所述的铁尿米-6-酬衍生物的制备方法，其特征在于2-簇基铁尿米- 6-酬与RiX反应结束后，反应液中加入二氯甲烧稀释，用水萃取除去水溶性杂质，有机层用 无水硫酸钢干燥，减压浓缩得混合物，再采用硅胶柱色谱纯化得到铁尿米-6-酬衍生物;其 中硅胶柱色谱采用的洗脱液为C出C12和MeOH的混合溶液。10. 权利要求1-5任一一项所述的铁尿米-6-酬衍生物或其在药学上可接受的盐、水合 物在制备抗肿瘤药物中的用途。
【专利摘要】本发明公开了一种铁屎米-6-酮衍生物或其在药学上可接受的盐、水合物，所述的铁屎米-6-酮衍生物如结构式I所示，其中：R1选自-OR2、-NHR3、-NR4R5、含一个或多个N的杂环基团；R2选自除甲基外的烷基、取代烷基、苯环取代的烷基、环烷基、苯基、取代苯基；R3、R4、R5分别独立地选自烷基、苯环取代的烷基、苯基、取代苯基。本发明还公开了铁屎米-6-酮衍生物或其在药学上可接受的盐、水合物在制备抗肿瘤药物中的用途。本发明首先通过6步反应合成2-羧基铁屎米-6-酮原料，再对2-羧基铁屎米-6-酮进行结构修饰制得铁屎米-6-酮衍生物，铁屎米-6-酮衍生物对A549、HepG2具有显著的抑制活性。
【IPC分类】A61P35/00, C07D471/16
【公开号】CN105693718
【申请号】CN201610149243
【发明人】冯锋, 曲玮, 叶峰, 柳文媛, 张冬萍, 唐婧, 赵依凡
【申请人】中国药科大学
【公开日】2016年6月22日
【申请日】2016年3月14日
文档序号 :
【 9919268 】
技术研发人员：冯锋,曲玮,叶峰,柳文媛,张冬萍,唐婧,赵依凡
技术所有人：中国药科大学
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
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