一种治疗骨质增生的药物组合物的制作方法
[0152] (1)家兔：体重2. 0~2. 7kg，雄性。
[0153] (2)KM 小鼠，体重 18. 5 ~22. 5g。
[0154] 2. 1.2实验仪器、试剂
[0155] (1)酶标仪、电子天平等
[0156] (2)青霉素、链霉素、生理盐水、消毒酒精等。
[0157] 2. L 3 阳性药
[0158] (1)抗骨增生片；（2)吗啡
[0159] 【治疗家兔实验性膝关节增生药效学及其机理】
[0160] 取家兔40只，以戊巴比妥钠30mg/kg耳缘静脉注射麻醉，固定于手术台上，选左膝 在无菌条件下施行手术，于股骨上段绑扎止血带，切除内侧半月板并切断内侧副韧带后，逐 层缝合切口，放松止血带。手术结束后，家兔分笼饲养，并连续3天肌注青霉素钠40万U/ 只，防止伤口感染。同时将已造模的家兔按体重随机分为5组，每组8只，分别作为：模型 组、阳性组、颗粒高、中、低剂量组。另取8只作为假手术组（只做假手术创伤）。药物高、 中、低剂量组按12. 54g浸膏/kg剂量灌胃给药，阳性组按0. 50g/kg剂量腹腔注射给予吗啡 生理盐水溶液，正常组和模型组灌胃给予纯净水，给药体积均为250ml/kg，连续2周。
[0161] 检测指标：于末次给药后2h，处死动物，立即解剖膝关节，置10%甲醛溶液中 固定、石腊包埋、切片、染色，光镜下观察软骨改变情况。将软骨增生程度按表3评分 标准进行打分，评价损伤程度。采用免疫组织化学方法观察关节软骨中基质金属蛋白 酶-I (MMP-I)、组织金属蛋白酶抑制剂（HMP-I)、聚蛋白多糖酶-4(ADAMTS-4)，记录阳性细 胞数量。
[0162]表3软骨增生成都评价标准
[0164] 【对醋酸致小鼠扭体反应治疗作用】
[0165] 取昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机等分为5组，每组10只，分别作为：按体重随 机分为7组，每组10只，分别作为：对照组、阳性组、颗粒高、中、低剂量组。药物高、中、低 剂量组按23. 3g浸膏/kg灌胃给药，阳性组按2. 5mg/kg剂量腹腔注射给予吗啡生理盐水溶 液，对照组灌胃给予纯净水，体积均为20ml/kg，每日一次，连续7d。于末次给药后lh，每只 小鼠腹腔注射〇. 6%冰醋酸0. lml/10g，记录注射后5~15min内出现的扭体反应次数。
[0166] 【对小鼠热刺激所致疼痛治疗作用】
[0167] 选取昆明种雌性小鼠（痛阈值<5s或>30s者或易跳跃者剔除）70只，随机等分为 7组，剂量及时间、体积同上。于末次给药后2测定各实验组小鼠痛阈值，以动物投入热板至 出现舔后足的时间为该鼠的痛阈值，超过60s的以60s计。
[0168] 2. 1.4.实验结果
[0169] 【治疗家兔实验性膝关节增生药效学及其机理】
[0170] 由图4可知，与模型组比较，药物高、中剂量组家兔膝关节软骨增生分数有极显著 减小（P〈0. 01)，低剂量组有显著减小（P〈0. 05);与阳性组比较，药物高剂量组有显著减小 (P〈0. 05)。结果表明，药物对家兔骨质增生具有良好的抑制作用。
[0171] 由图5可知，与模型组比较，药物高、中剂量组家兔膝关节软骨MMP-I阳性细胞有 极显著减少（P〈〇. 01)，低剂量组有显著减少（P〈〇. 05);与阳性组比较，药物高剂量组有显 著减少（P〈〇. 05)。
[0172] 由图6可知，与模型组比较，药物高、中、低剂量组家兔膝关节软骨HMP-I阳性细 胞均有极显著增多（P〈〇. 01);与阳性组比较，药物高剂量组有显著增多（P〈〇. 05)。
[0173] 由图7可知，与模型组比较，药物高剂量组家兔膝关节软骨ADAMTS-4阳性细胞有 极显著减少（P〈〇. 01)，中、低剂量组有显著减少（P〈〇. 05)。
[0174] 【对醋酸致小鼠扭体反应治疗作用】
[0175] 由图8可知，与对照组比较，药物高、中、低剂量组小鼠扭体次数均有极显著减少 (P〈0. 01);与阳性组比较，药物高剂量组有显著减少（P〈0. 05)。结果表明，药物对醋酸致小 鼠扭体反应具有良好的对抗作用。
[0176] 【对小鼠热刺激所致疼痛治疗作用】
[0177] 由图9可知，与对照组比较，药物高、低剂量组小鼠痛阈值有极显著增大 (P〈0.01)，中剂量组有显著增大（P〈0.05);与阳性组比较，药物高剂量组有显著增大 (P〈0. 05)。结果表明，药物可显著提高小鼠痛阈值。
[0178] 【实验结论】
[0179] 本发明制备的药物颗粒具有良好的抗骨质增生效果，其作用机理可能与降低基 质金属蛋白酶I (MMP-I)、聚蛋白多糖酶-4 (ADAMTS-4)活性，提高基质金属蛋白酶抑制剂 I (IlMP-I)活性有关，同时该颗粒还表现出了良好的镇痛作用。
【主权项】
1. 一种治疗骨质增生的药物组合物，其特征在于：其原料药包括如下重量配比的药 味： 防风4~60份，五灵脂2~45份，当归3~36份，赤芍4~60份，独活2~60份，防 己3~50份，桑寄生3~50份，熟地黄5~60份，川弯3~48份，制草乌2~30份，牛膝 3~60份，元胡2~45份，红花2~40份，威灵仙4~50份，桂枝5~60份，制川乌2~ 30份。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：其原料药包括如下重量配比的药 味： 防风15份，五灵脂10份，当归12份，赤芍20份，独活15份，防己10份，桑寄生15份， 熟地黄20份，川芎12份，制草乌15份，牛膝15份，元胡15份，红花10份，威灵仙15份，桂 枝10份，制川乌15份。3. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料药制 备而成的制剂： 防风4~60份，五灵脂2~45份，当归3~36份，赤芍4~60份，独活2~60份，防 己3~50份，桑寄生3~50份，熟地黄5~60份，川弯3~48份，制草乌2~30份，牛膝 3~60份，元胡2~45份，红花2~40份，威灵仙4~50份，桂枝5~60份，制川乌2~ 30份。4. 根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料药制 备而成的制剂： 防风15份，五灵脂10份，当归12份，赤芍20份，独活15份，防己10份，桑寄生15份， 熟地黄20份，川芎12份，制草乌15份，牛膝15份，元胡15份，红花10份，威灵仙15份，桂 枝10份，制川乌15份。5. 根据权利要求1~4任意一项所述的药物组合物，其特征在于：它是由所述原料药 的药粉、或原料药的水或/和乙醇提取物为活性成分，加上药学上常用的辅料或辅助性成 分制备而成的制剂。6. 根据权利要求1~5任意一项所述的药物组合物，其特征在于：所述制剂为经胃肠 道吸收制剂。7. 权利要求1-6任意一项所述药物组合物的制备方法，其特征在于：它包括如下操作 步骤： (1) 按配比称取原料药； (2) 取原料药，加水提取，合并水提液，加上药学上常用的辅料或辅助性成分制备成制 剂。8. 权利要求1-6任意一项所述药物组合物在制备抗炎、镇痛或治疗骨质增生的药物中 的用途。9. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述药物是治疗颈椎骨质增生、腰椎骨质 增生、含椎间盘突出或膝关节骨质增生的药物。10. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述药物是降低基质金属蛋白酶1、聚蛋 白多糖酶-4活性或/和提高基质金属蛋白酶抑制剂1活性的药物。
【专利摘要】本发明提供了一种治疗骨质增生的药物组合物，其原料药包括如下重量配比的药味：防风4～60份，五灵脂2～45份，当归3～36份，赤芍4～60份，独活2～60份，防己3～50份，桑寄生3～50份，熟地黄5～60份，川芎3～48份，制草乌2～30份，牛膝3～60份，元胡2～45份，红花2～40份，威灵仙4～50份，桂枝5～60份，制川乌2～30份。本发明各药物配伍精当，相辅相成，能够有效用于对腰椎、膝关节、颈椎等各个部分的骨质增生疾病的治疗，且安全无毒，为临床用药提供了新的选择。
【IPC分类】A61P29/00, A61K35/24, A61K36/804, A61P19/08
【公开号】CN105079240
【申请号】CN201410201713
【发明人】熊永爱, 苏柘僮, 张帅杰
【申请人】成都百草和济科技有限公司
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2014年5月13日
文档序号 :
【 9359504 】
技术研发人员：熊永爱,苏柘僮,张帅杰
技术所有人：成都百草和济科技有限公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
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