核桃蛋白复合纳米颗粒及其稳定的Pickering乳液的制备方法

本发明涉及食品科学与工程。更具体地说，本发明涉及一种核桃蛋白复合纳米颗粒及其稳定的pickering乳液的制备方法。

背景技术：

1、白藜芦醇(resveratrol，rt)是从植物中提取的非黄酮类的天然多酚有机化合物，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、神经保护、改善缺血损伤等多种药理活性而受到广泛关注。然而，据报道白藜芦醇的异构化现象和水溶性差，限制了其在食品加工、药物制备和活性膜制备过程中开发与利用。通过纳米颗粒、乳液等运载体系包埋可以显著改善其稳定性及水溶性，可有效控制白藜芦醇在胃肠道特定环境下缓慢且持续释放，进从而提高白藜芦醇的生物利用度。

2、植物蛋白具有良好的生物相容性、表面活性，被应用于食品领域，目前越来越多研究发现水不溶性蛋白纳米颗粒是制备pickering乳液的优良载体材料。核桃蛋白可通过自组装制成核桃纳米颗粒，具有良好的生物相容性和生物粘附性，是一种理想的载体材料。然而，由于核桃纳米颗粒水溶性较差，核桃纳米颗粒稳定的pickering乳液往往不稳定。如何以核桃蛋白制备的食品级固体颗粒稳定pickering乳液以保护和递送白藜芦醇，拓宽白藜芦醇在食品领域的应用范围，是本申请亟待解决的技术难题。

技术实现思路

1、本发明提供一种核桃蛋白复合纳米颗粒及其稳定的pickering乳液的制备方法，核桃蛋白复合纳米颗粒具有的高稳定性、高安全性的特点，核桃蛋白复合纳米颗粒能够用于稳定pickering乳液，为功能性食品等相关行业中白藜芦醇的输送提供了一种很有应用前景的替代品。

2、为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种核桃蛋白复合纳米颗粒的制备方法，包括：

3、分别制备核桃蛋白悬浮液和肉苁蓉多糖悬浮液，然后以核桃蛋白与肉苁蓉多糖的质量比为1:1将核桃蛋白悬浮液加入肉苁蓉多糖悬浮液搅拌，得到混合液，取过量的水在真空下旋转蒸发，得到蛋白质量浓度为3g/100ml的纳米颗粒分散体，预冷冻，真空冷冻干燥，得到核桃蛋白复合纳米颗粒。

4、优选的是，核桃蛋白的制备方法包括：

5、将核桃粉溶解在0.5mol/lnacl水溶液中，在75℃、300r/min条件下搅拌12-24h，直到完全溶解，再以3000r/min条件下离心10min，收集上清液，将ph调整为12，在-80℃的冰箱中预冷冻12h，然后在-50℃下真空冷冻干燥72h，即得冻干粉。

6、优选的是，核桃蛋白的制备方法还包括：

7、将冻干粉溶解在0.5mol/l nacl水溶液中，用0.1m hcl溶液调节ph为4.5，添加冻干粉重量0.5％的淀粉葡萄糖苷酶，在55℃条件下酶解3h，高温灭酶，添加冻干粉重量0.5％的植物乳杆菌，在25℃条件下发酵2天，再以3000r/min条件下离心10min，收集沉淀，在-80℃的冰箱中预冷冻12h，然后在-50℃下真空冷冻干燥72h，即得核桃蛋白。

8、所述的制备方法得到的核桃蛋白复合纳米颗粒。

9、所述的核桃蛋白复合纳米颗粒在制备pickering乳液中的应用。

10、核桃蛋白复合纳米颗粒稳定的pickering乳液的制备方法，包括：

11、采用所述的制备方法得到核桃蛋白复合纳米颗粒，制备核桃蛋白复合纳米颗粒悬浮液；

12、以核桃蛋白复合纳米颗粒悬浮液为水相，以负载活性成分的核桃油为油相，超声细胞破碎混合处理，即得核桃蛋白复合纳米颗粒稳定的pickering乳液。

13、优选的是，活性成分为白藜芦醇。

14、优选的是，按照体积分数为10％将白藜芦醇溶解于核桃油中搅拌溶解，制备油相，与质量分数为1％的核桃蛋白复合纳米颗粒悬浮液混合，超声细胞破碎250w混合处理4min，即得核桃蛋白复合纳米颗粒稳定的白藜芦醇pickering乳液。

15、所述的制备方法得到的核桃蛋白复合纳米颗粒稳定的pickering乳液。

16、本发明至少包括以下有益效果：

17、第一、本发明采用核桃蛋白(wp)和肉从蓉多糖(cdps)构建了wp/cdps复合纳米颗粒，肉苁蓉多糖与蛋白的复合，使其具有一定的乳化稳定性，代替部分乳化剂应用于食品加工中。核桃蛋白具有良好的生物相容性和生物粘附性，同时利用肉从蓉多糖的强负电荷、增强的亲水性和更好的分散性，与正电荷核桃蛋白制备wp/cdps复合纳米颗粒作为稳定剂制备pickering乳液，具有粒径小、贮藏稳定性高等特点，可以改善活性成分的稳定性和抗氧化活性。

18、第二、本发明通过制备核桃蛋白，获得的核桃总蛋白含量较高，通过进一步纯化核桃蛋白，自身溶解性以及乳化稳定性得到提高。

19、本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

1.核桃蛋白复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括：

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，核桃蛋白的制备方法包括：

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，核桃蛋白的制备方法还包括：

4.权利要求1-3任一项所述的制备方法得到的核桃蛋白复合纳米颗粒。

5.权利要求4所述的核桃蛋白复合纳米颗粒在制备pickering乳液中的应用。

6.核桃蛋白复合纳米颗粒稳定的pickering乳液的制备方法，其特征在于，包括：

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，活性成分为白藜芦醇。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，按照体积分数为10％将白藜芦醇溶解于核桃油中搅拌溶解，制备油相，与质量分数为1％的核桃蛋白复合纳米颗粒悬浮液混合，超声细胞破碎250w混合处理4min，即得核桃蛋白复合纳米颗粒稳定的白藜芦醇pickering乳液。

9.权利要求6-8任一项所述的制备方法得到的核桃蛋白复合纳米颗粒稳定的pickering乳液。