4-(取代苯胺基)喹唑啉衍生物二甲苯磺酸盐的多晶型物及其制备方法和用图

2025-11-02 10:40:02 69次浏览

%，将得到的产物进行X-射线粉末衍射，结果表明该产物为化合物I晶型D，X-RH)图谱见图7所示。
[0142] 实施例6:N-(4-(3-氟苄氧基)-3-氯苯基)-6-(5-((2-(甲基亚砜基）乙基氨基）甲基)-2-呋喃基)-喹唑啉-4-胺二甲苯磺酸盐(化合物I)晶型B的制备
[0143] 将化合物I晶型D 2g在80°C条件下烘干1小时，得黄色结晶性粉末，将得到的产物进行X-射线粉末衍射，结果表明该产物为化合物I晶型B，X-RH)图谱见图4所示;DSC检测数据显示晶型B在239.11~254.49°C熔融分解;DSC图谱见图5所示。
[0144] (注：由于化合物I晶型C、D高温(60°C以上)会转化为化合物I晶型A、B，因此未进行 DSC检测。）
[0145] 本发明对化合物I无定形物、晶型A、B、C、D的稳定性进行了研究，于温度25 ± 2 °C，湿度60 % ± 10 % ;温度40 ± 2 °C，湿度75 % ± 5 %条件下对稳定性考察6个月。试验结果显示，化合物I无定形物有明显的降解，说明化合物I无定形物稳定性较差;晶型A、B、C、D最大单质和总杂质均未见明显增加，并将上述考察后的样品经X-射线粉末衍射等分析测试方法验证化合物I晶型A、B、C、D均稳定。试验结果见表2。
[0146] 表2化合物I无定形物、晶型A、B、C、D的稳定性试验结果
[0147]
[0148] 本发明对化合物II、化合物I无定形物、晶型A、B、C、D的溶解度进行了研究。取拟检测化合物，置250ml的碘量瓶中，加水，于25°C±2°C，每间隔5分钟强力振摇30秒钟，观察30 分钟内的溶解情况。试验结果见表3。
[0149] 表3化合物II、化合物I无定形物、晶型A、B、C、D在水中溶解度试验结果「01501
[0151 ]结果表明：化合物II在水中不溶，化合物I无定形物、晶型A、B、C、D在水中微溶，说明晶型A、B、C、D比化合物II更有利于药物在体内的溶出。
[0152] 生物学实验
[0153] 可以使用以下实验来测定本发明所述化合物对erbB酪氨酸激酶的活性作用以及在体外作为N87细胞和BT474细胞抑制剂的作用。
[0154] A)蛋白酪氨酸激酶磷酸化测定
[0155] 体外激酶分析用Cell Signaling Technology公司的HTScan EGF Receptor Kinase Assay Kit(#7909)和HTScan HER2/ErbB2Kinase Assay Kit(#7058)检测。操作步骤参照试剂盒说明书，该方法在体外检测待测化合物对EGFR或Her2受体酪氨酸激酶对底物肽磷酸化的抑制作用。室温下激酶反应缓冲液中温育ATP和底物肽以及待测化合物，孵育一段时间后，加入终止液终止反应并将样品转移到链霉亲和素包被的96孔板中，洗板并用HRP 标记的抗底物磷酸化抗体检测底物肽上的磷酸化水平，用TMB显色，2M硫酸中止反应。检测 450nm吸收波长，计算IC5Q值(μΜ)。结果见表4所示。
[0156] Β)细胞增值抑制
[0157] 参考Rusnak等，Cel 1 Prol if，2007，40，580-594中描述的方法进行试验。细胞增殖抑制试验采用人乳腺癌细胞BT474和人胃癌细胞系NCI-N87，BT474高表达Her2受体，N87高表达EGFR和Her2受体。
[0158] 在含10%胎牛血清、2mM谷氨酰胺和非必需氨基酸的Dulbecco改良Eagle培养基 (DMEM)中，在37°C、5%C0 2细胞培养箱中培养细胞，应用胰蛋白酶/乙二胺四乙酸(EDTA)从细胞培养瓶中收获细胞。细胞以4000/孔(0. lml培养基)加入96孔细胞培养板贴壁过夜，加入0. lml待测化合物的稀释液，DMS0的最终浓度为0.25 %，将细胞培养板在37 °C，5 %的⑶2 条件下温育72h。然后在显微镜下观察细胞形态的变化，然后每孔加入50% (质量/体积）的三氯乙酸(TCA)50yl固定细胞。TCA的终浓度为10%，静置5min后在4°C冰箱中放置lh，培养板各孔用去离子水冲洗5遍，以去除TCA，甩干，空气干燥至无湿迹。每孔加0.4% (质量/体积）的SRBlOOyl，室温放置10min，弃去各孔内液体后用1 %乙酸冲洗5遍，空气干燥后用pH为 10.5，10mM Tris base(三羟甲基氨基甲烷）150μ1萃取，检测540nm的吸收波长。结果1(：50值 (μΜ)见表4所示。
[0159] 表4本发明化合物I的晶型A、Β、C、D对EGFR和Her 2的抑制活性分析
[0160]
[0161] 注："++++"指IC5Q值<0·025μΜ; "+++"指IC5Q值为0·025-0·10μΜ。
[0162] 在作为评价化合物生物学活性的一个重要的"细胞增殖抑制试验"中可以看到，本发明化合物I的晶型A、B、C、D均具有较好的生物学活性。
[0163] 结果表明，本发明的化合物I的晶型A、B、C、D都是有效的酪氨酸激酶抑制剂。
【主权项】
1. 化合物I的多晶型物，其特征在于，所述多晶型物为晶型B或者晶型C2. 根据权利要求1所述的多晶型物，其特征在于，所述晶型B，使用化-Κα福射，Κ2Θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱在4.6° ±0.2° ,8.3° ±0.2° ,9.1° ±0.2° ,12.0° ±0.2° ,13.9° ±0.2°，15.0° ±0.2° ,15.8° ±0.2° ,17.6° ±0.2° ,18.7° ±0.2° ,19.7° ±0.2°，20.8° ± 0.2° ,22.2° ±0.2° ,22.8° ±0.2°，26.0° ±0.2°处有特征峰;优选地，所述晶型Β具有基本如同图4所示出的X-射线粉末衍射图谱。3. 根据权利要求1所述的多晶型物，其特征在于，所述晶型Β在239.11~254.49°C烙融分解，优选地，所述晶型B具有如图5所示的差示扫描量热图谱。4. 根据权利要求1所述的多晶型物，其特征在于，所述晶型C，使用化-Κα福射，Κ2Θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱在4.4° ±0.2° ,9.5° ±0.2° ,12.7° ±0.2° ,14.9° ±0.2° ,16.1° ±0.2°，17.1° ±0.2° ,19.4° ±0.2° ,19.8° ±0.2° ,20.9° ±0.2° ,21.4° ±0.2°，23.7° ± 0.2° ,26.8° ±0.2°处有特征峰;优选地，所述晶型C具有基本如同图6所示出的X-射线粉末衍射图谱。5. 权利要求1-4任一项所述多晶型物的制备方法，包括如下步骤： (1) 化合物I晶型C的制备，其包括W下步骤：将化合物I在加热回流条件下溶于四氨巧喃/水体系中，降溫析晶，过滤，惊干，得化合物I晶型C;或者， (2) 化合物I晶型Β的制备，其包括W下步骤：将化合物I在加热回流条件下溶于乙醇/水体系中，降溫析晶，过滤，惊干，得化合物I晶型D，将化合物I晶型D在60~150°C下烘干，得化合物I晶型Β。6. -种药物组合物，其包含权利要求1-4任一项所述的多晶型物，W及任选的一种或多种药学可接受的赋形剂。7. 权利要求1-4任一项所述的多晶型物在制备用于治疗和/或预防哺乳动物(包括人）与受体酪氨酸激酶相关的疾病或病症的药物中的用途。8. 权利要求1-4任一项所述的多晶型物在制备用于治疗或辅助治疗和/或预防哺乳动物(包括人）由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤或由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移的药物中的用途。9. 根据权利要求7或8所述的用途，其特征在于，所述与受体酪氨酸激酶相关的疾病或病症、由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤、或由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞的增殖和迁移包括erbB受体酪氨酸激酶敏感癌症，如EGFR或化r2高表达及EGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀脫、脑/中枢神经系统、乳房、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺、神经元、食道、卵巢、膜腺、前列腺、肾脏、皮肤、睾丸、甲状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋己瘤。
【专利摘要】4-(取代苯胺基)喹唑啉衍生物二甲苯磺酸盐的多晶型物及其制备方法和用途，本发明涉及作为酪氨酸激酶抑制剂N-(4-(3-氟苄氧基)-3-氯苯基)-6-(5-((2-(甲基亚砜基)乙基氨基)甲基)-2-呋喃基)-喹唑啉-4-胺二甲苯磺酸盐(化合物I)的多晶型物。具体而言，本发明涉及化合物I的晶型A、B、C和D。本发明还涉及化合物I的多晶型物的制备方法，包括它的药物组合物以及它们的制药用途。本发明化合物I的多晶型物是有效的酪氨酸激酶抑制剂。
【IPC分类】A61P35/00, C07D405/04, A61K31/517, A61P35/02
【公开号】CN105566305
【申请号】CN201610092050
【发明人】王晶翼, 范传文, 冷传新, 张进, 林栋 , 王丙忠, 王会成
【申请人】齐鲁制药有限公司
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2012年3月6日
【公告号】CN103304544A, CN103304544B, WO2013131465A1

文档序号 : 【 9803297 】

技术研发人员：王晶翼,范传文,冷传新,张进,林栋,王丙忠,王会成
技术所有人：齐鲁制药有限公司

备注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
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