突变型番茄及其用于预防体重增加和/或治疗肥胖相关疾病的用图
[0056]例如，所述组合物是可食用的基于番茄的食物产品，包括加工的成熟-缺陷突变型番茄的果实和至少一种益生元和/或至少一种益生菌。示例性的食物产品包括番茄果汁、番茄酱汁、番茄干、腌制番茄、番茄酱、番茄泥、含番茄的调味汁、汤、饮料和含番茄的任何产品。加工的番茄产品例如番茄汁、番茄泥、番茄酱汁和番茄酱通常是通过清洗番茄果实、将清洗过的番茄果实初步加热(主要用于酶的灭活)、从初步加热后的清洗过的原料中提取果汁、加热(主要用于灭菌)或进一步地浓缩以及混合后同样地加热提取的果汁。
[0057]在另一个实施例中，本发明提供了一种动物食物组合物，所述组合物包括番茄植株、果实、片段或其提取物，其中，番茄是成熟-缺陷突变型番茄，优选成熟抑制(rin)突变型番茄。例如，其是“轻的”家常宠物配方，适用于控制宠物体重。
【附图说明】
[0058]图1:使用建立的小鼠3T3-L1成纤维细胞模型系统通过rin番茄提取物在体外抑制脂肪形成。TNF alpha作为抑制胰岛素诱导的脂肪积累的阳性对照。阴性对照:胰岛素诱导的细胞。溶剂对照:用0.1%的DMSO处理的胰岛素诱导的细胞。Elegance:用对照番前变种“Elegance”0% rin的提取物处理的胰岛素诱导的细胞。Gusto Delight:用rin番前变种“Gusto Delight” (75% rin)的提取物处理的胰岛素诱导的细胞。Tomango:用rin番前变种“Tomango”(rin纯合子，100% rin)的提取物处理的胰岛素诱导的细胞。
[0059]实验部分
[0060]rin含量的测定
[0061]用RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen, Hilden,德国)，提取和纯化各变种的番前果实的总RNA，所述各变种的番茄果实含有不同的rin含量，包括普通的(RIN/RIN基因型)植株，(绿熟期、粉熟期和红熟期)和相关阶段的各时期的rin突变型(rin/rin)植株，如上所述(Kitagawa et al., Characterizat1n of tomato fruit ripening andanalysis of gen express1n in Fl - Hybrids of the ripening inhibitor (rin)Mutant.Phys1lPlantarium 2005，123 (3): 331-338)。互补 DNA (Complementary DNA)是用 PrimeScript II first cDNA strand synthesis kit (Takara B1tech 公司)以总 RNA为模板合成的，然后作为实时定量荧光PCR(real-time PCR)的模板使用。rin基因的表达水平使用rin特异的寡核苷酸引物(基因库登录号AF448522)，由实时荧光定量反转录-PCR(qRT-PCR)分析。
[0062]番茄提取物的制备
[0063]将新鲜的番茄果实切成约I X I X Icm的碎块。使用整个果实。接下来冻干所述碎块，冻干的材料用杵或研钵研磨成均匀的粉末。用提取溶剂(甲醇或甲醇/水80:20v/v混合物)提取所述粉末。典型地，I克粉末用13mL的溶剂提取。在室温下进行提取(超声30分钟后剧烈震荡30分钟)。离心提取混合物，并且在真空下干燥沉淀物。在用于脂肪形成试验之前，干燥的提取物在DMSO (Q:体积？)中重新溶解。提取物的浓缩物相当于375mg/ml原粉。
[0064]体外脂肪形成试验
[0065]根据之前Niwano 等描述的步骤进行分析。(Niwano et al.Extensive screeningfor plant foodstuffs in Okinawa, Japan with ant1-obese activity on adipocytes invitr0.Plant Foods Hum Nutr.2009Mar ;64 (I):6-10)。
[0066]相比于DMSO提取物，本试验中的番茄提取物的终浓度为1:10.000(例如，相当于每毫升37.5yg原粉。最终的DMSO浓度为0.1%。TNFa (10ng/ml)作为抑制脂肪形成的阳性对照。
[0067]小鼠3T3-L1成纤维细胞(Dainippon制药有限公司，大阪，日本)在DMEM中调节到30000cells/ml，并加入10% CS, 200 μ I细胞悬浮物移入到96孔培养板中，在37°C、5%的CO2湿度的恒温箱中培养2天。将培养基变为补加10% FCS,0.5mM IBMX和I μΜ DEX的DMEM，继续培养2天(不同于分化)。将培养基变为补加10% FCS和10 μ g/ml胰岛素的DMEM，并进一步培养2天。其后，将培养基变为正常的培养基(补加10% FCS的DMEM)，并且每24小时用新鲜的培养基代替。从分化初始(O天)到第10天加入每个样品溶液(番茄提取物或对照)。
【主权项】
1.用在预防增重和/或抑制、预防或改善哺乳动物与肥胖相关的病情的方法中的番茄的植株、果实、片段或其提取物，其中所述番茄是成熟-缺陷突变型番茄。
2.根据权利要求1的所用的番茄的植株、果实、片段或其提取物，其中所述突变型番茄携带rin、nor和/或Nr基因。
3.根据权利要求1或2的所用的番茄的植株、果实、片段或其提取物，其中所述番茄携带rin基因，优选地，其中所述番前为rin纯合子。
4.根据权利要求3的所用的番茄的植株、果实、片段或其提取物，其中所述番茄选自变种 “Sliimmy”、“Mr Tasty，，、“Gusto Delight” 和 “Tomango，，。
5.根据前述权利要求中的任何一项的所用的番茄的植株、果实、片段或其提取物，其中使用的是果实、根或其提取物。
6.根据权利要求5的番茄的果实提取物，其中所述提取物由醇类提取制备。
7.根据前述权利要求中的任意一项的所用的番茄的植株、果实、片段或其提取物，其中所述哺乳动物是人类个体，优选地，所述人类个体发生与脂肪形成相关疾病状况的风险增尚O
8.根据权利要求7的所用的番茄的植株、果实、片段或其提取物，其中，所述人类个体罹患或容易发展为肥胖、脂质贮积症、高血脂、2型糖尿病、心脏病、中风、高血压、癌症、代谢综合症、胆囊疾病、痛风、睡眠呼吸暂停、哮喘或儿童肥胖。
9.一种抗脂肪形成剂，包括番茄的植株、果实或其片段的提取物作为活性组分，其中，所述番茄是成熟-缺陷突变型番茄。
10.根据权利要求9的抗脂肪形成剂，其中所述突变型番前携带rin、nor和/或Nr基因，优选地，其中所述番茄携带rin基因。
11.根据权利要求9或10的抗脂肪形成剂，其中所述提取物是番茄果实或根的醇类提取物，优选甲醇提取物，更优选在70:30-95:5 (v/v)范围的MeOH/水制备的提取物。
12.—种制药、动物食品、营养品或化妆品的组合物，包括番茄的植株、果实、片段或其提取物，其中所述番茄为成熟-缺陷突变型番茄。
13.—种制药、营养品、食品、饮品或化妆品的组合物，包括番茄的植株、果实、片段或其提取物，其中所述番茄是成熟-缺陷突变型番茄，并进一步包括至少一种益生菌和/或至少一种益生元。
14.根据权利要求12或13的制药、营养品、食品、饮品或化妆品组合物，其中所述突变型番前携带rin、nor和/或Nr基因。
15.—种用于生产抗脂肪形成剂的方法，包括用溶剂提取番茄的植株、果实、或其片段的原料，其中所述番茄是成熟-缺陷突变型番茄，优选成熟抑制(rin)突变型番茄。
16.根据权利要求15的方法，其中所述原料在提取之前被冷冻干燥或喷雾干燥。
17.根据权利要求15或16的方法，其中所述溶剂为醇类溶剂，优选甲醇溶剂，更优选在70:30-95:5 (v/v)范围的 MeOH/ 水。
18.—种用于在主体中诱导体重减轻和/或预防体重增加的方法，包括向主体施用治疗有效剂量的药物配方，所述药物配方包括成熟-缺陷突变型番茄的植株、果实、片段或其提取物，以及可接受的载体。
【专利摘要】本发明涉及番茄用于抑制、改善或预防脂肪形成介导的、诸如肥胖、脂类贮存疾病和高血脂的疾病的用途。本发明提供了一种用在预防体重增加和/或抑制、预防或改善哺乳动物中与脂肪形成相关的疾病状况的方法中的番茄的植株、果实、片段或其提取物，其中，番茄是成熟-缺陷突变型番茄，例如成熟抑制(rin)、不成熟(nor)和/或永不成熟(Nr)基因突变型番茄。还提供了抗脂肪形成的提取物和包括所述提取物的组合物。
【IPC分类】A61K36-81, A01H5-08
【公开号】CN104837336
【申请号】CN201380053307
【发明人】阿里迪尔克·范德尔温特
【申请人】绿色4健康有限公司
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2013年8月13日
【公告号】CA2881810A1, EP2882280A1, WO2014027886A1
文档序号 :
【 8515133 】
技术研发人员：阿里迪尔克·范德尔温特
技术所有人：绿色4健康有限公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
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