治疗急性胰腺炎的复方中药水提物及其制备方法
[0016] 二、清胰II号不同水提物对SAP大鼠的疗效观察 1材料与方法 I. 1主要实验材料 1.1.1实验动物SD大鼠，第三军医大学大坪医院实验动物中心提供，体重在 250g-300g之间的SD大鼠(雌雄不限)。动物质量合格证号：SCXK-(渝）20120005。大鼠购 入后专人饲养10天。
[0017] 1.1. 2主要实验药品 牛磺胆酸钠：Sigma公司 清胰II号不同提取物：本实验课题组提供 大鼠血清淀粉酶、IL-1、IL-6、IL-8、MTL检测试剂盒：昆明绿盟科技有限公司代购 I. 1. 3主要实验仪器 不同规格移液器：l-20uL、l-200uLUOOOuL:华美生物工程公司 15ml离心管：华美生物工程公司 电子天平AnalyticBalance:上海精科天平厂 胰岛素泵输液管及针头：美敦力(加工改良） 微量注射泵：浙江史密斯医学仪器有限公司 手术立体显微镜LEICAF12 :苏州六六视觉科技股份有限公司 D-37520Osterode冰冻离心机：德国制造 DU-800紫外分光光度计：美国BECKMANCOULTER-80°C低温冰箱：德国FormaScientic 常规剖腹手术器械、灌胃器：购于遵义医药公司 1. 2实验方法 1. 2. 1动物分组 将体重在200g-250gSD大鼠（雌雄不限）32只随机分为假手术组（A组，n=8)、SAP模 型组（B组，n=8)、清胰II号水提大孔树脂未吸附物组（C组，n=8)、 清胰II号水提大孔树脂吸附乙醇脱洗物组（D组，n=8)。
[0018] 1.2.2动物模型制备 动物麻醉后常规消毒，仅打开腹腔后关腹，建立假手术组。同上述方式用5%牛磺胆酸 钠0.lml/lOOg、6ml/h微量泵入建立大鼠SAP模型。
[0019] 1.2.3制模后给药方法 制模成功Ih后，C组大鼠喂饲浓度为20%清胰II号水提大孔树脂未吸附物lml/lOOg/次；D组大鼠喂饲浓度为20%清胰II号水提大孔树脂吸附乙醇脱洗物lml/lOOg/次，每隔8h 重复灌胃1次，总共3次；SAP模型组大鼠以等量等次生理盐水灌胃。
[0020] 1. 2. 4标本采集 分别于制模后24小时，每组大鼠用10%水合氯醛0. 3ml/100g再次麻醉动物，由原切口 进入腹腔，收集计量腹水，经门静脉取血，常温搁置2小时后，冰冻离心机离心1200转/分 约5分钟，吸取上层血清置于EP管中，保存于-80°C冰箱备用。
[0021] 1.3统计分析 数据按照完全随机对照设计的实验要求处理并建立数据库，采用SPSS17.0for windows统计软件进行统计分析。统计数据以if^表示，各指标组间数据比较采用独立样 本单因素方差分析，P< 0.05表示有显著性差异，P< 0.01表示有非常显著性差异，产> 0. 05表不无差异性。
[0022] 2?结果 2. 1血清淀粉酶浓度的变化 B组大鼠血清淀粉酶浓度较A组明显升高0° < 0.05)。C、D两组组大鼠血清淀粉酶浓 度较B组明显降低0° < 0.05)。C组大鼠血清淀粉酶浓度与D组相比无差异0° > 0.05)。 见表2. 1。
[0023] NoteiA/* < 0.05BgroupcomparedwithAgroup,A/* < 0.05C,Dgroup comparedwithBgroup, ?/*>0? 05ascomparedwithgroupC、Deachother. 2. 2血清IL-1、IL-6、IL-8浓度的变化 B组大鼠血清IL-1、IL-6、IL-8浓度较A组明显升高G°< 0. 05)。C、D两组组大鼠 血清IL-I浓度较B组明显降低0° < 0. 05)。C组大鼠血清IL-I浓度与D组相比无差异0° > 0. 05)。C、D两组大鼠血清IL-6浓度与B组相比无差异0° > 0. 05)，(：组大鼠血清11-6 浓度与D组相比无差异0° > 0.05)。C、D两组组大鼠血清IL-8浓度较B组明显降低0° < 0.05)。C组大鼠血清IL-8浓度与D组相比无差异0° > 0.05)。见表2. 2
Note: < 0. 05BgroupcomparedwithAgroup,AP<0. 05C,Dgroup comparedwithBgroup, ?/*>0? 05ascomparedwithgroupC、Deachother. 2. 3血清胃动素浓度的变化 B组大鼠血清胃动素浓度较A组明显升高0° < 0.05)。C、D两组组大鼠血清胃动素浓 度较B组明显降低(产< 0.05)。C组大鼠血清胃动素浓度与D组相比无差异0° > 0.05)。 见表2. 3
Note: ▲尸 < 0. 05BgroupcomparedwithAgroup，AP<0. 05C,Dgroup comparedwithBgroup，?尸>0? 05ascomparedwithgroupC、Deachother. 结论 清胰II号水提大孔树脂未吸附物和清胰II号水提大孔树脂吸附乙醇脱洗物对大鼠SAP治疗均有效，两者疗效无差异。
[0024] 三、OFR对SAP大鼠肠黏膜屏障的损害及清胰II号水提物的保护作用 1材料与方法 1.1主要实验材料 I.I. 1实验动物SD大鼠，第三军医大学大坪医院实验动物中心提供，体重为 250g-300gSD大鼠（雌雄不限）。动物质量合格证号：SCXK-(渝）20120005。大鼠购入后适 应性饲养10天，专人饲养。
[0025] 1.1. 2主要实验药品 牛磺胆酸钠：Sigma公司 清胰II号大孔树脂未吸附物：本实验课题组提供 大鼠血清D-乳酸检测试剂盒：昆明绿盟科技有限公司代购 肠黏膜X0、MDA、SOD检测试剂盒：大连泛邦化工技术有限公司 N-乙酰半胱氨酸：上海谷研实业有限公司 I. 1. 3主要实验仪器 不同规格移液器l-20uL、l-200uLUOOOuL:华美生物工程公司 15ml、50ml离心管：华美生物工程公司 电子天平AnalyticBalance:上海精科天平厂 胰岛素泵输液管及针头：美敦力(加工改良） 微量注射泵：浙江史密斯医学仪器有限公司 匀楽机器：中国Soniprep 手术立体显微镜LEICAF12 :苏州六六视觉科技股份有限公司 D-37520Osterode冰冻离心机：德国制造 DU-800紫外分光光度计：美国BECKMANCOULTER -80°C低温冰箱：德国FormaScientic 常规剖腹手术器械、灌胃器：购于遵义医药公司 1. 2实验方法 1. 2. 1实验动物分组 将32只体重在200g-250g之间的SD大鼠(雌雄不限）随机分为假手术组（A组，n=8)、SAP模型组（B组，n=8)、N-乙酰半胱氨酸阳性对照组（C组，n=8)、清胰II号组（D组，n=8)。
[0026] 1. 2. 2动物模型制备 动物麻醉后常规消毒，仅打开腹腔后关腹，建立假手术组。同上述制模方式建立大鼠SAP模型。
[0027] 1. 2. 3给药方法 制模成功后lh，经腹腔注射10%N-乙酰半胱氨酸（200mg/Kg)，建立N-乙酰半胱氨酸阳 性对照组；清胰II号组大鼠喂饲浓度为20%清胰II号水提大孔树脂未吸附物lml/lOOg/次， 每隔8h重复灌胃1次，总共3次；SAP模型组大鼠以等量等次生理盐水灌胃。
[0028] L2. 4标本采集 分别于制模后24小时，每组大鼠用10%水合氯醛0.Im3/100g再次麻醉动物，经原切口 进入腹腔，经门静脉取血，常温搁置2小时后，冰冻离心机离心1200转/分约5分钟，吸取 上层血清置于试管中，保存于_80°C冰箱内备用。取距回盲部IOcm小肠组织约5mm，液氮冷 藏后取出，置于制冷后的研钵中加5ml/500mg冷PBS溶液研磨，过滤后低温匀浆，1000转/ 分后离心取上清液备用。
[0029] I. 3统计分析： 数据按照完全随机对照设计的实验要求处理并建立数据库，采用SPSS17.0for windows统计软件进行统计分析。统计数据以〗f^表示，各指标组间数据比较采用独立样 本单因素方差分析，P< 0.05表示有显著性差异，P< 0.01表示有非常显著性差异，产> 0. 05表不无差异性。
[0030] 2 结果 2. 1大鼠肠黏膜丙二醛(MDA)含量的变化 B组大鼠肠黏膜MDA含量较A组明显升高0° < 0.05)。C、D两组大鼠肠黏膜MDA含量 较B组明显降低0° < 0.05)。C、D两组肠黏膜MDA含量，组间比较无统计学意义(产>0. 05)。 见表3. 1
Note:▲/*<0? 05BgroupcomparedwithAgroup,AP<0. 05C、Dgroupcompared withBgroup,?/*>0? 05ascomparedwithgroupC、Deachother
文档序号 :
【 8911697 】
技术研发人员：兑丹华,蔡治方,田飞,王後,兰天罡
技术所有人：遵义医学院附属医院
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
技术研发人员：兑丹华,蔡治方,田飞,王後,兰天罡
技术所有人：遵义医学院附属医院
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