一种从红景天中提取红景天苷的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从红景天中提取红景天苷的方法，包括以下步骤：将红景天药材粉碎，以水作为溶剂，采用超声波辅助提取1～4次，合并提取液过滤得到滤液A；经过大孔树脂柱，收集红景天苷的洗脱液B，减压浓缩洗脱液B得到干燥物C；用无水乙醇溶解后，通过模拟移动床色谱分离，得到富含红景天苷的组分D；经过浓缩、结晶、离心、干燥得到红景天苷产品；本发明所述的红景天苷的提取方法操作简便，产业上应用前景好，产率与产品纯度较高，以本发明的技术方案得到的红景天苷收率达70%以上，所得产品含红景天苷98%以上。
【专利说明】一种从红景天中提取红景天苷的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从红景天中提取红景天苷的方法。
【背景技术】
[0002]红景天(Rhodiola)为景天科红景天属多年生草本或亚灌木植物，是珍稀药用植物之一，被誉为“高原人参”。该属植物在全世界共约90种，在我国分布70多种，主产于华北、东北、西南、西北和华中等地区。其化学成分主要有黄酮类、酪醇、红景天苷(Salidroside)、谷留醇、有机酸、挥发油、多糖、脂肪、蛋白质等。其中，红景天苷及其苷元酪醇是红景天主要有效成份，也是评价红景天及其提取物的最重要指标。现代药理学研究证实，红景天提取物具有抗衰老、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗缺氧、抗疲劳、抗福射、抗氧化、镇痛、对中枢神经及内分泌系统双向调节等多种活性，且具有很小副作用。
[0003]天然红景天中红景天苷的提取和分离方法主要有层析法、超滤纯化法、醇沉纯化法、大孔树脂吸附法等。柱层析法可得到较高纯度的红景天苷，但有效成分损失严重，收率太低，只适用于微量标准品的制备；超滤纯化法超滤膜使用过程中，膜污染易造成膜通量锐减，膜清洗过程要用到大量的碱和酸，而且分离选择性较差，产品质量不稳定；乙醇沉淀法在去除杂质的同时，所得干浸膏粘度较大，易吸潮，给后期工艺操作带来不便，此法耗醇量大，成本高，处理时间较长；大孔树脂吸附法使用较为普遍，但仅依靠大孔吸附树脂一种分离方法，得到的红景天苷产品纯度还是偏低。
[0004]模拟移动床色谱技术是将模拟移动床的设计思想引入液相制备色谱中，既保持了液相制备色谱的消耗小、分离纯度高，以及可变温操作等优点，又克服了通常液相制备色谱不能连续操作的缺点，使其具有分离能力强，设备体积小，投资成本低，并特别有利于分离热敏性高及难分离的物系等特点。
【发明内容】
[0005]为了克服上述现有技术中存在的缺陷，本发明提供了一种从红景天中高效提取红景天苷的方法。本发明的技术方案为:
一种从红景天中提取红景天苷的方法，包括以下步骤:
[1)预处理:将红景天药材粉碎，置于水中浸泡；
[2)提取:以水作为提取溶剂，将步骤[11预处理的药材采用超声波辅助提取法，提取1-4次，合并提取液后过滤得到滤液A ；
[3)大孔树脂纯化:将步骤I2I得到的滤液A经过大孔树脂柱，收集红景天苷的洗脱液B，减压浓缩洗脱液B至干，得到干燥物C ；
[4)模拟移动床纯化:将步骤[3)中的干燥物C用无水乙醇溶解后，通过模拟移动床色谱分离，得到富含红景天苷的组分D ;
[5)将步骤丨4]中富含红景天苷的组分D浓缩、结晶、离心、干燥得到红景天苷产品。[0006]所述步骤[I)中，粉碎后的红景天药材浸泡时间为f2h。
[0007]所述步骤[2)中，超声提取温度为50~80°C，提取时间为30~60min，提取f 4次；数次提取消耗提取溶剂的总体积与红景天原料质量之比为5~20L/kg。
[0008]本发明步骤I I中使用的大孔树脂为AB-8、DlOl等非极性大孔吸附树脂，吸附后用I~2倍于柱体积的水洗去杂质，再用2~3倍于柱体积的50~70%乙醇洗脱红景天苷。
[0009]本发明步骤14]中，每克干燥物C用IOml无水乙醇溶解；模拟移动床色谱填充的吸附剂为硅胶，洗脱剂为体积比等于1:9的乙醇-乙酸乙酯溶液；吸附区流速I~2BV/h ;洗脱区流速I~3BV/h ;切换时间为600~800s ;温度控制在30°C~50°C;压力控制在0.2MPa~
0.6MPa。
[0010]本发明步骤R中，将富含红景天苷的组分D浓缩至固形物含量为30~50wt.%,析出结晶，抽滤，40°C~60V真空干燥得红景天苷产品。
[0011 ] 进一步地，本发明所述步骤(3]中，滤液A经大孔吸附树脂吸附后用，优选用2倍于柱体积的水洗去杂质，再用3倍于柱体积的70%乙醇洗脱红景天苷。
[0012]进一步地，本发明所述步骤[4]中，模拟移动床色谱吸附区流速优选2BV/h ;洗脱区流速2优选BV/h ;切换时间优选800s ;温度优选40°C ;压力优选0.4MPa。
[0013]本发明所述的红景天苷的提取方法操作简便，产业上应用前景好，产率与产品纯度较高，以本发明的技术方案得到的红景天苷收率达70%以上，所得产品含红景天苷98%以上。
【具体实施方式】
[0014]实施例1
称取5kg高山红景天，粉碎后加入30L水，40°C浸泡Ih，65°C下超声提取60min，之后再提取2次，每次均加入提取溶剂水30L。合并提取液后过滤，得到的滤液A经过大孔吸附树脂做初步纯化。大孔吸附树脂以AB-8为树脂柱，以2倍柱体积的水洗除杂后，用3倍柱体积的70%乙醇洗脱红景天苷。将得到的洗脱液B减压浓缩至蒸干，得到干燥物C约109g。再用1090ml无水乙醇将干燥物C溶解，所得溶液进入模拟移动床色谱。模拟移动床填充的吸附剂为硅胶，洗脱剂为体积比等于1:9的乙醇-乙酸乙酯溶液；吸附区流速2BV/h ;洗脱区流速2BV/h ;切换时间800s ;温度40°C ;压力0.4MPa。经模拟移动床分离得到的富含红景天苷的组分D。将组分D浓缩至固形物含量50wt.%，析出结晶，抽滤后以60°C真空干燥得红景天苷产品39.5g，含量98.6%，红景天苷的收率为72.0%。
[0015]实施例2
称取8kg大花红景天，粉碎后加入80L水，40°C浸泡lh，70°C下超声提取60min，之后再提取I次，加入的提取溶剂水为80L。合并提取液后过滤，得到的滤液A经过大孔吸附树脂做初步纯化。大孔吸附树脂以DlOl为树脂柱，以2倍柱体积的水洗除杂后，用3倍柱体积的70%乙醇洗脱红景天苷。将得到的洗脱液B减压浓缩至蒸干，得到干燥物C约162g。再用1620ml无水乙醇将干燥物C溶解，所得溶液进入模拟移动床色谱。模拟移动床填充的吸附剂为硅胶，洗脱剂为体积比等于1:9的乙醇-乙酸乙酯溶液；吸附区流速2BV/h ;洗脱区流速2BV/h ;切换时间800s ;温度40°C ;压力0.4MPa。经模拟移动床分离得到的富含红景天苷的组分D。将组分D浓缩至固形物含50wt.%，析出结晶，抽滤后以60°C真空干燥得红景天苷产品62.2g，含量98.1%，红景天苷的收率为76.3%。
[0016]实施例3
称取5kg小丛红景天，粉碎后加入30L水，40°C浸泡lh，70°C下超声提取65min，之后再提取2次，每次均加入提取溶剂水30L。合并提取液后过滤，得到的滤液A经过大孔吸附树脂做初步纯化。大孔吸附树脂以DlOl为树脂柱，以2倍柱体积的水洗除杂后，用3倍柱体积的70%乙醇洗脱红景天苷。将得到的洗脱液B减压浓缩至蒸干，得到干燥物C76.2g。再用762ml无水乙醇将干燥物C溶解，所得溶液进入模拟移动床色谱。模拟移动床填充的吸附剂为硅胶，洗脱剂为体积比等于1:9的乙醇-乙酸乙酯溶液；吸附区流速2BV/h ;洗脱区流速2BV/h ;切换时间800s ;温度40°C ;压力0.4MPa。经模拟移动床分离得到的富含红景天苷的组分D。将组分D浓缩至固形物含量50 wt.%，析出结晶，抽滤后以60°C真空干燥得红景天苷产品30.3g，含量98.9%，红景天苷的收率为78.6%。
[0017]实施例4 用高效液相色谱法检测红景天苷的含量 色谱条件:
色谱柱:C18 柱，(5.0Mm, 4.6mmX 150.0mm)
流动相冰-乙腈-磷酸(体积比为93.0:7.0: 0.2)
流速:1.0mL/min 检测波长:223nm
用红景天苷标准品作为对照，利用峰面积外标法计算产品红景天苷的含量。标准品HPLC谱图中红景天苷的保留时间为14.521min，实施例1产品HPLC谱图中红景天苷的保留时间为14.528min, 二者在221nm和275nm均有最大吸收。
【权利要求】
1.一种从红景天中提取红景天苷的方法，其特征在于包括以下步骤: ⑴预处理:将红景天药材粉碎，置于水中浸泡； (2)提取:以水作为提取溶剂，将步骤W预处理的药材采用超声波辅助提取法，提取 4次，合并提取液后过滤得到滤液A ； (3)大孔树脂纯化:将步骤⑵得到的滤液A经过大孔树脂柱，收集红景天苷的洗脱液B，减压浓缩洗脱液B至干，得到干燥物C ； 4模拟移动床纯化:将步骤(3)中的干燥物C用无水乙醇溶解后，通过模拟移动床色谱分离，得到富含红景天苷的组分D ; (5』将步骤4中富含红景天苷的组分D浓缩、结晶、离心、干燥得到红景天苷产品。
2.如权利要求1所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法，其特征在于:所述步骤⑴中，粉碎后的红景天药材浸泡时间为l~2h。
3.如权利要求1或2所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法，其特征在于:所述步骤⑵中，超声提取温度为50~80°C，提取时间为30~60min，提取f 4次；数次提取消耗提取溶剂的总体积与红景天原料质量之比为5~20L/kg。
4.如权利要求3所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法，其特征在于:所述步骤 中，大孔树脂柱填充非极性大孔吸附树脂，吸附后用I~2倍于柱体积的水洗去杂质，再用2~3倍于柱体积的50~70%乙醇洗脱红景天苷。
5.如权利要求4所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法，其特征在于:所述非极性大孔吸附树脂可以是AB-8或DlOl。
6.如权利要求4所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法，其特征在于:所述步骤(3)中，经大孔树脂吸附后，优选用2倍于柱体积的水洗去杂质，再用3倍于柱体积的70%乙醇洗脱红景天苷。
7.如权利要求1、2、4、5或6所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法，其特征在于:所述步骤⑷中，每克干燥物C用IOml无水乙醇溶解；模拟移动床色谱填充的吸附剂为硅胶，洗脱剂为体积比等于1:9的乙醇-乙酸乙酯溶液；吸附区流速I~2BV/h ;洗脱区流速I~3BV/h ;切换时间为600~800s ;温度控制在30°C~50°C ;压力控制在0.2MPa~0.6MPa。
8.如权利要求7所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法，其特征在于:所述步骤W中，模拟移动床色谱吸附区流速优选2BV/h ;洗脱区流速2优选BV/h ;切换时间优选800s ;温度优选40°C ;压力优选0.4MPa。
9.如权利要求7所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法，其特征在于:所述步骤?)中，将富含红景天苷的组分D浓缩至固形物含量为30~50wt.%，析出结晶，抽滤，40°C~60 °C真空干燥得红景天苷产品。
10.如权利要求7所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法，其特征在于:红景天药材原料的品种可以是高山红景天、大花红景天或小丛红景天。
【文档编号】C07H1/08GK103467540SQ201310463903
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年10月9日 优先权日:2013年10月9日
【发明者】白易, 赵永强, 马亚琼, 廖小雪, 贾洪涛 申请人:白心亮
文档序号 :
【 3485457 】
技术研发人员：白易,赵永强,马亚琼,廖小雪,贾洪涛
技术所有人：白心亮
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
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