一种杨梅果渣酵素片及其制备方法

本发明属于水果加工，具体涉及一种杨梅果渣酵素片及其制备方法。

背景技术：

1、杨梅是我国特产水果之一，含有丰富的酚类、糖类、有机酸、蛋白质维生素、矿物质等营养成分。随着杨梅果汁的生产，有大量的杨梅果渣累积。杨梅果渣极易腐烂变质，随意丢弃会造成环境污染和资源浪费。杨梅果渣中依旧含有大量花色苷、多酚、糖类、氨基酸、维生素、膳食纤维等物质，具有潜在的综合利用价值。目前，杨梅果渣的开发利用主要集中在花色苷与酚类物质的提取与纯化方面，对杨梅果渣产品的开发较少。杨梅果渣的利用还有很大的研究空间，推动杨梅果渣资源的利用，不仅能减少杨梅汁加工行业带来的废弃物问题，还能极大地提高杨梅资源的利用率与附加值，推动经济发展。

2、益生菌可改善宿主免疫功能、调节肠道菌群平衡、增强抗氧化能力等重要益生功能。但是机体摄入益生菌后，消化系统会抑制或杀死乳酸菌，对其益生功能有较大影响。因此益生菌在肠道中发挥其益生功能首要条件是对消化系统的耐受性。益生菌的协同作用亦是其肠道发挥益生功能的重要条件。

3、目前，以杨梅果渣为发酵原料，利用消化系统应激处理来筛选能够协同作用发酵杨梅果渣、在人体消化系统内具有高耐受性的益生菌菌株，再将发酵制备的杨梅果渣酵素粉与益生菌复配制备成酵素片的报道较少。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种杨梅果渣酵素粉和能够协同作用发酵杨梅果渣、在人体消化系统内具有高耐受性的益生菌复配制备成的酵素片及其制备方法，色泽艳丽、营养丰富、具有杨梅风味、抗氧化活性强。

2、本发明提供了一种杨梅果渣酵素粉的制备方法，包括以下步骤：将杨梅果渣与水甘蔗汁混合后，调整糖度为18～27°bx，得发酵料液；对所述发酵料液依次进行酵母菌、乳酸菌和醋酸菌的发酵，对最终得到的发酵液进行过滤，收集滤液后去除乙醇，冷冻干燥后得所述杨梅果渣酵素粉。

3、优选的，所述酵母菌的接种量为所述发酵料液的0.01～0.05％，在接种酵母菌后于20～25℃发酵24～48h。

4、优选的，所述乳酸菌的接种量为所述酵母菌的发酵液的0.5～1.0％，在接种乳酸菌后于30～37℃发酵2～6d。

5、优选的，所述醋酸菌的接种量为所述乳酸菌的发酵液的0.08～0.15％，在接种所述醋酸菌后于28～37℃发酵24～48h。

6、本发明还提供了利用上述制备方法制备得到的杨梅果渣酵素粉。

7、本发明还提供了一种能在上述杨梅果渣酵素粉的酵素液中生长代谢且在人体消化系统内具有高耐受性的益生菌的筛选方法，包括以下步骤：

8、(1)挑取含有酵母菌、乳酸菌和醋酸菌的杨梅果渣酵素粉的杨梅果渣酵素液分别于pda培养基、mrs培养基和醋酸菌培养基中进行培养，离心收集菌体；

9、(2)将得到的菌体混合后进行消化系统应激处理，得到经消化系统应激处理后的菌体；

10、(3)将得到的经消化系统应激处理后的菌体稀释并涂布于pda、mrs和醋酸菌培养基平板上进行培养，筛选典型菌落；

11、(4)利用筛选得到的典型菌落发酵制备杨梅果渣酵素；

12、(5)对利用步骤(4)制备的杨梅果渣酵素重复步骤(1)～(4)数次，即得到能协同作用发酵杨梅果渣酵素且在人体消化系统内具有高耐受性的益生菌。

13、优选的，所述挑取含有酵母菌、乳酸菌和醋酸菌的杨梅果渣酵素粉的杨梅果渣酵素液的体积为10～500μl，分别于10～500mlpda培养基、mrs培养基和醋酸菌培养基中进行培养，离心收集菌体。

14、优选的，所述消化系统应激处理包括：模拟唾液消化、模拟胃液消化和模拟肠液消化。

15、优选的，所述筛选典型菌落包括筛选酵母菌、乳酸菌和醋酸菌的菌落。

16、优选的，利用步骤(4)制备得到的杨梅果渣酵素用于下一轮益生菌的筛选，作为步骤(1)中培养酵母菌、乳酸菌和醋酸菌的料液。

17、优选的，重复上述步骤15～25次。

18、本发明还提供了利用上述筛选方法筛选得到的益生菌制备而成的益生菌粉。

19、本发明还提供了一种杨梅果渣酵素片，由上述杨梅果渣酵素粉和筛选所得的益生菌粉制成。

20、优选的，所述杨梅果渣酵素粉与所述益生菌的菌粉的质量比为1:0.3～2。

21、本发明还提供了一种具有抗氧化活性的酵素片的制备方法，包括以下步骤：将上述益生组合物压片，制备得到所述具有抗氧化活性的酵素片。

22、本发明还提供了利用上述制备方法制备得到的具有抗氧化活性的酵素片。

23、相对于现有技术，本发明具有以下有益效果:

24、本发明着眼于充分利用杨梅果渣资源，利用复合发菌发酵的同时筛选在人体消化系统内具有高耐受性且可协同作用的益生菌，创新性地以杨梅果渣为原料，生产色泽艳丽、营养丰富、具有杨梅风味、包含在人体消化系统内具有高耐受性且可协同作用的益生菌的杨梅果渣酵素片。

25、本发明通过在杨梅果渣酵素发酵过程条件控制制备杨梅果渣酵素粉，此过程既是杨梅果渣酵素粉的制备过程，亦是能在杨梅果渣酵素环境中协同生长代谢的复合益生菌的筛选过程。从杨梅果渣发酵液中获取可在杨梅果渣酵素环境中协同生长代谢能够的酵母菌、乳酸菌和醋酸菌，再经过模拟消化系统应激反应来筛选具有高耐受性的益生菌菌体。

26、本发明以杨梅果渣为原料，延长了杨梅加工的产业链，减少了杨梅资源的浪费。本发明采用酵母菌、乳酸菌和醋酸菌分段发酵技术：发酵速度快、减少功能成分的损失；在乳酸菌及醋酸菌的作用下产生乳酸、醋酸等有机酸，不仅能减少在发酵过程中花色苷的降解，还增加了酵素的活性物质。酵素片为杨梅果渣酵素粉与益生菌组合物组成的固体，能够减缓杨梅果渣酵素中花色苷的降解，保留杨梅果实特有的风味，益生菌组合物能够调整肠道菌群，获得了具有益生功能的酵素片。

1.一种杨梅果渣酵素粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将杨梅果渣与水甘蔗汁混合后，调整糖度为18～27°bx，得发酵料液；对所述发酵料液依次进行酵母菌、乳酸菌和醋酸菌的发酵，对最终得到的发酵液进行过滤，收集滤液后去除乙醇，冷冻干燥后得所述杨梅果渣酵素粉。

2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述酵母菌的接种量为所述发酵料液的0.01～0.05％，在接种酵母菌后于20～25℃发酵24～48h。

3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述乳酸菌的接种量为所述酵母菌的发酵液的0.5～1.0％，在接种乳酸菌后于30～37℃发酵2～6d。

4.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述醋酸菌的接种量为所述乳酸菌的发酵液的0.08～0.15％，在接种所述醋酸菌后于28～37℃发酵24～48h。

5.利用权利要求1～4任一项所述制备方法制备得到的杨梅果渣酵素粉。

6.一种能在权利要求5所述杨梅果渣酵素粉的酵素液中生长代谢且在人体消化系统内具有高耐受性的益生菌的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

7.利用权利要求6所述筛选方法筛选得到的益生菌制备而成的益生菌粉。

8.一种益生组合物，其特征在于，包括权利要求5所述杨梅果渣酵素粉和权利要求7所述益生菌粉。

9.根据权利要求8所述益生组合物，其特征在于，所述杨梅果渣酵素粉和益生菌粉的质量比为1:0.3～2。

10.一种利用权利要求8或9所述益生组合物制备得到的具有抗氧化活性的酵素片。