紫叶酢浆草组培快繁方法
技术领域：
本发明涉及一种组织培养快速繁殖技术，尤其是指涉及紫叶酢浆草组培快繁方法。
背景技术：
紫叶酢浆草(Oxalis regnellii)是酢浆草科酢浆草属多年生草本，原产于热带美洲，花为淡紫色，叶呈三角形且长年紫红色，具有很大的观赏价值。它的繁殖一般都采用切分块茎的方法，但这样的繁殖速度慢，远远不能满足市场的需要。利用组培技术可以建立起一套快速简便的工厂化繁殖方法，此方法增殖速度快、增值倍数高且又操作简便，适用于大规模工厂化生产，具有很大的经济价值。
发明内容
本发明目在于提供一种紫叶酢浆草组培快繁方法，用组培技术建立起一套快速简便的工厂化繁殖方法，以适用于大规模工厂化生产。
本发明目的通过下述方案实现一种紫叶酢浆草组培快繁方法，步骤依序为第一，采集外植体、消毒、建立无菌苗；第二，建立一套试管苗的快速繁殖循环体系；第三，炼苗移栽，其中，所述外植体取自紫叶酢浆草新抽出的叶片与叶柄，将叶柄切成0.5cm左右小段后接种在初代培养基上，把叶片切成小块后接种到同样培养基上，在培养温度为22-26℃，光照时间12-14小时/天，光照强度为2000-3000Lux的条件下培养28-30天后就分化出无菌的再生植株；所述试管苗的快速繁殖循环体系以叶柄为起始材料，诱导分化出小芽，再进行芽增殖培养，最后从芽团上切下一部分芽的叶柄作为繁殖起始材料，余下的芽团切分成单株后进行生根培养。
本发明的优越性在于用组培技术建立起了一套快速简便的工厂化繁殖方法，具有繁殖、增殖快，比例可达每45天增殖45-60倍，生根率高，可达100％。适用于大规模工厂化生产。
具体实施例方式
1，外植体消毒和无菌苗的建立取紫叶酢浆草新抽出的叶片与叶柄，用洗洁精清洗后用流水冲洗干净，用75％酒精浸洗3-5秒，无菌水冲洗2-3遍，再用0.1％HgCl2溶液浸泡3min，无菌水冲洗4-6次。将叶柄切成0.5cm左右小段后接种在初代培养基上，初代培养基为Ms+NAA0.5-0.7mg/L上，把叶片切成小块后接种到同样培养基上。拓培养温度为22-26℃，光照时间12-14h/d，光照强度为2000-3000Lux的条件下培养28-30天后就分化出无菌的再生植株。
2 试管苗的快速增值紫叶酢浆草的增殖是以叶柄为起始材料，诱导分化出小芽，再进行芽增殖培养，最后从芽团上切下一部分芽的叶柄作为繁殖起始材料，余下的芽团切分成单株后进行生根培养，增殖比例可达每45天增殖45-60倍，这样就建立了一完整的快速繁殖循环体系。
(1)叶柄诱导分化从芽团上切下高5cm以上的叶柄并切分为长0.5cm左右小段，接到诱导分化培养基Ms+NAA0.5-0.7mg/L上培养28天，分化出的芽高1cm左右，分化率达93.3％。培养条件为温度22-26℃，光照时间12-14h/d，光照强度为2000-3000Lux。
(2)芽增殖培养把刚分化出的芽转移到芽增殖培养基Ms+6-BA0.4-0.6mg/L上，培养12-15天，可获得均匀一致的苗高达5cm左右，芽个数增殖3-5倍。培养条件同上。每个芽团上切下2-3根叶柄，约15-20小段，进行继续繁殖。
(3)生根培养余下的芽团按鳞球切分为单株接到生根培养基Ms+NAA0-0.05mg/L上进行生根培养，切分比例为1∶3-5，培养7-9天后开始生根，生根率达100％，21天后根系发达，鳞球变大，芽也变粗壮，苗高达6-8cm。
3 炼苗移栽当苗在生根培养基上培养21天后，将瓶口打开，炼苗3-5天后移栽到带营养土容器中，营养土成分为农田土∶泥碳土∶砂子＝4∶3∶3。移栽初期，即前7天，保持环境温度在15-30℃，湿度50％以上，移栽的成活率达100％。
权利要求
1.一种紫叶酢浆草组培快繁方法，步骤依序为第一，采集外植体、消毒、建立无菌苗；第二，建立一套试管苗的快速繁殖循环体系；第三，炼苗移栽，其中，所述外植体取自紫叶酢浆草新抽出的叶片与叶柄，将叶柄切成0.5cm左右小段后接种在初代培养基上，把叶片切成小块后接种到同样培养基上，在培养温度为22-26℃，光照时间12-14小时/天，光照强度为2000-3000Lux的条件下培养28-30天后就分化出无菌的再生植株；所述试管苗的快速繁殖循环体系以叶柄为起始材料，诱导分化出小芽，再进行芽增殖培养，最后从芽团上切下一部分芽的叶柄作为繁殖起始材料，余下的芽团切分成单株后进行生根培养。
2.根据权利要求1所述的紫叶酢浆草组培快繁方法，其特征在于所述初代培养基为Ms+NAA0.5-0.7mg/L。
3.根据权利要求1所述的紫叶酢浆草组培快繁方法，其特征在于所述对外植体的消毒用洗洁精清洗后用流水冲洗干净，用75％酒精浸洗3-5秒，无菌水冲洗2-3遍，再用0.1％HgCl2溶液浸泡3min，无菌水冲洗4-6次。
4.根据权利要求1所述的紫叶酢浆草组培快繁方法，其特征在于所述叶柄诱导分化是从芽团上切下高5cm以上的叶柄并切分为长0.5cm左右小段，接到诱导分化培养基中(Ms+NAA0.5-0.7mg/L)培养28天，分化出的芽高1cm左右，分化率达93.3％。培养条件为温度22-26℃，光照时间12-14h/d，光照强度为2000-3000Lux。
5.根据权利要求4所述的紫叶酢浆草组培快繁方法，其特征在于所述诱导分化培养基为Ms+NAA0.5-0.7mg/L。
6.根据权利要求1所述的紫叶酢浆草组培快繁方法，其特征在于所述的芽增殖培养是把刚分化出的芽转移到芽增殖培养基上培养12-15天，获得均匀一致的苗高达5cm左右，芽个数增殖3-5倍；培养条件相同，从每个芽团上切下2-3根叶柄，15-20小段，进行继续繁殖。
7.根据权利要求6所述的紫叶酢浆草组培快繁方法，其特征在于所述芽增殖培养基Ms+6-BA0.4-0.6mg/L。
8.根据权利要求1所述的紫叶酢浆草组培快繁方法，其特征在于所述生根培养是将余下的芽团按鳞球切分为单株接到生根培养基上进行生根培养，切分比例为1∶3-5，培养7-9天后开始生根，21天后根系发达，生根培养基为Ms+NAA0-0.05mg/L。
9.根据权利要求1所述的紫叶酢浆草组培快繁方法，其特征在于所述炼苗移栽系当苗在生根培养基上培养21天后，将瓶口打开，炼苗3-5天后，移栽到带营养土容器中，移栽前7天，保持环境温度在15-30℃，湿度50％以上。
10.根据权利要求10所述的紫叶酢浆草组培快繁方法，其特征在于所述营养土成分为农田土∶泥碳土∶砂子＝4∶3∶3。
全文摘要
本发明涉及一种紫叶酢浆草组培快繁方法。本发明步骤依序为采集外植体、消毒、建立无菌苗；建立一套试管苗的快速繁殖循环体系；炼苗移栽。所述外植体取自紫叶酢浆草新抽出的叶片与叶柄，将叶柄切成0.5cm左右小段后接种在初代培养基上，把叶片切成小块后接种到同样培养基上，在培养温度为22－26℃，光照时间12－14小时/天，光照强度为2000－3000Lux的条件下，培养28－30天后就分化出无菌的再生植株；所述试管苗的快繁循环体系以叶柄为起始材料，诱导分化出小芽，再进行芽增殖培养，最后从芽团上切下部分芽的叶柄作为繁殖起始材料，余下的芽团切分成单株后进行生根培养。
文档编号A01H4/00GK1586170SQ200410053518
公开日2005年3月2日 申请日期2004年8月6日 优先权日2004年8月6日
发明者宋学孟, 庞瑞华, 王凌健, 楼文阜, 董举文, 何燕红 申请人:上海光兆植物速生技术有限公司
文档序号 :
【 381006 】
技术研发人员：宋学孟,庞瑞华,王凌健,楼文阜,董举文,何燕红
技术所有人：上海光兆植物速生技术有限公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
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