生脉注射制剂及其制备方法
技术领域：
本发明是一种生脉注射制剂及其制备方法，特别是以传统中药红参、麦冬、五味子为原料制成的生脉注射制剂或益气复脉注射制剂及其它们的制备方法，属于中药技术的领域。
背景技术：
生脉注射液或益气复脉注射制剂均以传统中药红参、麦冬、五味子为原料制成，具有益气养阴、复脉固脱的功效，是一种用于气阴两亏，脉虚欲脱的心悸、气虚、四肢厥冷及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克的注射剂，目前临床上还用于治疗冠心病心绞痛、脾胃虚弱证、急性病毒性心肌炎、恶性肿瘤、小儿重症肺炎、病毒性肺炎、病毒性肝炎、视神经萎缩、糖尿病、颈椎病、银屑病、突发性耳聋等疾病。许多发明人及药品企业做了大量的研究工作，如专利申请号为“93110807.1”，名称为“生脉注射液及其制备工艺”的申请、专利申请号为“96117457.9”，名称为“一种生脉注射液及其制备方法”的申请，虽然这两份申请的产品具有一定的临床应用效果，但是制备方法中有提取五味子挥发油的过程；而本申请人进行过深入的研究，发现五味子挥发油含量低、药理作用不明显、具有刺激性，而且为了使挥发油溶解，通常要加入大量助溶剂，包括吐温一80，安全性令人担忧，更重要的是该申请中无五味子挥发油相关质量控制方法，工艺不合理；而专利申请号为“99114091.5”，名称为“治疗心血管的药物”的申请，采用大孔吸附树脂富集有效成分的工艺，方法虽好，但大生产的应用非常有限，大大增加了工艺成本，市场竞争力差；而有研究者提取了三味药材的总多糖，且红参、麦冬合提，采用水为提取溶剂，申请人进行过深入的研究，发现红参多糖、五味子多糖治疗该症疗效无明显优势，不仅增加了生产成本，且大量粘性多糖对制剂成型造成不良影响；例如，在制备注射剂时使得产品根本无法冻干；另外如果富集的是分子量为6000-100000的多糖，经我们研究发现，以截流分子量的方法得到的麦冬精多糖制成的制剂，疗效并不比以本发明工艺制备的粗多糖疗效更为理想，同时工艺的复杂性导致了生产成本的提高。本发明的结果确定，从药效学和生产成本的角度来讲，无需对粗多糖进行精制；并且红参皂苷水提收率低，与五味子用水合提不恰当；再者，为了达到《中药新药研究的技术要求》的相关规定 “以净药材为组份配制的注射剂应研究测定有效成分、指标成分或总类成分(如总多糖等)，选择重现性好的方法，并作方法学考察试验。所测定成分的总含量应不低于总固体量的20％(静脉用不少于25％)。调节渗透压等的附加剂，按实际加入量扣除，不应计算在内。”注总固体量是指注射剂中总固形物的量。
多数研究人员采用了大孔吸附树脂来精制药物，但是其有机物残留会带来许多毒性、安全性问题；鉴于这种情况，急需一种质量更加稳定，工艺合理可行的产品。
发明内容
本发明的目的在于提供一种质量更加稳定，工艺合理可行的生脉注射制剂及其制备方法，以解决现有技术存在的问题。
本发明是这样构成的，它是由红参90-110重量份、麦冬270-330重量份和五味子135-165重量份及适当的辅料制备成的，注射剂中可测成分占总固体量大于25％；以重量百分比计算所述注射制剂含有多种糖类成分、皂苷类成分，其中糖类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的5％-90％，制剂中不单独提取五味子挥发油类成分。
制剂中的糖类成分包含有单糖和多糖，以重量百分比计算其中的多糖含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的5％-80％。
制剂中的多糖类成分以麦冬多糖为主，按重量百分比计算其含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的5％-60％。
制剂中的麦冬多糖含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的15％-50％，皂苷类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的2％-30％。
制剂中的麦冬多糖含量，皂苷类成分的含量二者之和占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量为25％--80％。
所述的生脉注射制剂的制备方法取红参提取物、五味子提取物、麦冬提取物，混匀，滤过，以常规的方法制成注射液、葡萄糖静脉输液、氯化钠静脉输液、注射用浓溶液、粉针、冻干粉针。
所述的生脉注射制剂的制备方法红参提取物的制备方法采用常规的乙醇回流法提取，五味子提取物的制备方法是，取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，该工艺味提取五味子药材中的挥发油类成分。
麦冬提取物的制备方法是取麦冬药材，水煮醇沉后滤过，滤液回收乙醇后加水搅匀，静置，滤过，得滤液A，将醇沉的沉淀加水溶解，静置，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入活性炭处理，滤过，该工艺提取了麦冬药材中的多糖类成分。
优选方法为取麦冬药材，加5～10倍量的水提取1～4次，每次20～90min，滤过，滤液浓缩至相对对密度为1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，2～8℃静置6～20小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入1～4倍量注射用水溶解，2～8℃静置6～20小时，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为0.1-3％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物。
准确的说麦冬药材加8倍量的水提取3次，每次40min，滤过，滤液浓缩至1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，4℃静置12小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，搅拌均匀，4℃静置过夜，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为1％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物。
所述的生脉注射制剂的具体制备方法是将红参切片，用8倍量85％的乙醇回流4次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度60℃时1.10～1.15，加水至200ml，搅匀，4℃冷藏，滤过。滤液按体积加入0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得红参提取物；麦冬加8倍量的水提取3次，每次40分钟，滤过，滤液浓缩至60℃时1.0～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水，搅匀，4℃冷藏滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，4℃冷藏，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，按体积加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得麦冬提取物；取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，即得五味子提取物；取红参提取物、五味子提取物、麦冬提取物，混匀，滤过，以常规的方法制成注射液、葡萄糖静脉输液、氯化钠静脉输液、注射用浓溶液、粉针或冻干粉针。
本发明中，皂苷类成分包括了人参总皂苷、麦冬皂苷等。
本方中，人参大补元气、生津止渴，为君药；麦冬养阴生津、清热止渴，五味子收敛阴津、益气止汗，共为臣药，三者配伍，具有益气养阴、复脉固脱的功效。
与现有技术相比，本发明工艺更加合理可行、制剂可靠有效，产品生产成本低廉。本申请人经过大量实验研究发现，现有技术中有制备五味子挥发油的工序，但是它不仅含量低、药理作用不明显、还具有刺激性、且没有相关控制含量的方法，工艺不合理，浪费人力物力，增加成本，所得产品疗效并未提高；所以最终本发明去掉了部颁中药15册收载的“生脉注射液”标准中所示五味子提取工艺路线中用水蒸气蒸馏法收集馏出液这一步骤，仅采用水煮醇沉法对五味子药材进行提取纯化，未专门针对其挥发油类成份设计相应的工艺路线；简化了制备工艺；另外，经过考察，麦冬药材中的多糖成分对本发明产品的最终药效有很大的贡献，而且鉴于研究结果表明分子量6000-100000的多糖并不具有最佳的疗效，我们制备了麦冬粗多糖(包含单糖、低聚糖、多糖)，而红参、五味子药材中的同类成分无明显的效果，且大量的粘性多糖不利于最终产品的成型性和稳定性，因此，将本发明产品针对多糖的提取分离工艺确定为将麦冬、红参、五味子分别提取，麦冬药材在水煮醇沉之后，以水返溶的方式提取了麦冬中的多糖类成分；经实验证明，产品疗效好，工艺合理可行，节省了制备资金，更加科学合理，完全能达可测成分占到总固体量(除去辅料)25％的要求；本发明还提供了多种制剂的详细制作工艺，可以直接用于指导实际生产。
为了证实本发明提供的制剂的有效性，本申请人作了一系列实验
实验例(1)挥发油提取实验1组生脉注射液(含五味子挥发油)实验2组本发明工艺制备的注射液(红参、麦冬、五味子单独提取，制备的注射液，提取了五味子药材中的挥发油)实验3组本发明工艺制备的注射液(红参、麦冬、五味子单独提取，制备的注射液，未提取五味子药材中的挥发油)(1)试验物品和试剂 本发明粉针剂试验前加少许蒸馏水后稍加热(40℃左右)待其溶化后再用1％羧甲基纤维素钠稀释成混悬液备用；大肠杆菌内毒素标准品；动物昆明种小白鼠，体重22～24g，♂♀各半，试验前饲养观察一周。
①对小白鼠常压耐缺氧存活时间的影响 小鼠60只随机分4组。对照组腹腔注射等容量生理盐水，给药组按临床用量1/20剂量腹腔注射，15分钟后将动物放于125ml广口磨口瓶内(瓶内置25g钠石灰，并以滤纸覆盖)，每瓶一只，立即以凡士林封闭，计时，记录自小白鼠投入后至死亡的时间，结果见表。
对小白鼠常压耐缺氧存活时间的影响(x±s)组别动物数(只) 剂量(g/kg)缺氧存活时间(min)空白对照20 - 10.3±1.7实验1组 20 4.0 16.4±2.9实验2组 20 4.0 16.0±1.3实验3组 20 4.0 16.8±2.1②对小白鼠游泳疲劳时间的影响 小鼠60只随机分4组。实验前同法预先给药3天，实验当日再给药一次后30分钟，于小白鼠尾根部负2g的重物，将小白鼠放入80×60×40cm水池内，水深25cm，水温20±1℃，每次各组放一只，观察小白鼠头部沉入水中10秒钟不能浮出水面者的游泳时间，结果见表。
对小白鼠游泳时间的影响(x±s)组别 剂量(g/kg)动物数(只)小白鼠游泳时间(min)空白对照-206.15±3.14实验1组4.0 208.13±3.50实验2组4.0 208.35±1.30实验3组4.0 208.45±2.32③对小鼠耐寒冷的影响 小鼠60，按体重随机分为4组；给药组分别用三种生脉液临床用量的1/20量腹腔注射给药，对照组腹腔注射等容器生理盐水。30分钟后将各组小鼠混装于铁笼中，置于11～12℃的室外寒冷环境中，直至对照组小鼠死亡半数时，记录各组的死亡数。
组别 剂量(g/kg) 物数(只)死亡数对照组 等容量N.S. 20 13实验1组4.0 20 10实验2组4.0 20 9实验3组4.0 20 6(2)急性毒性实验小鼠安全性试验体重20～21g的小鼠，随机分为6组，每组6只分别用三种生脉液临床给药剂量(g/kg)的50倍和100倍剂量腹腔注射给药，观察三日各组均未见任何毒副反应，均无小鼠发生死亡。
(3)局部刺激性实验研究取体重2kg以上健康的家兔，每组4只，分别在其左右两股四头肌内以无菌操作法各注入供试品或生理盐水对照1ml，注射后48小时处死动物，解剖取出股四头肌，纵向切开，观察注射局部刺激反应。
反应级 刺激反应
0无明显变化1轻度充血，其范围在0.5cm×1.0cm以下2中度充血，其范围在0.5cm×1.0cm以上3重度充血，伴有肌肉变性4出现坏死，有褐色变性5出现广泛性坏死反应级组别0级(次数) 1级(次数) 2级(次数) 3级(次数) 4级(次数) 5级(次数)1供试 0 2 2 0 0 01对照 4 0 0 0 0 02供试 1 1 2 0 0 02对照 4 0 0 0 0 03供试 3 1 0 0 0 03对照 4 0 0 0 0 0从以上实验看出，含有五味子挥发油的市售样品和自制样品与不含五味子挥发油的自制样品比较，药理活性有降低的趋势、刺激性明显增强。
(4)成型工艺取含生药2.84g/ml的药液，分别与支架剂甘露醇、葡萄糖和乳糖进行混合，0.22μm滤膜过滤后冷冻干燥，每支西林瓶装溶液2ml。冻干机Edwards SNL-3200冷冻干燥机(美国热电Thermo)。冻干条件-40℃，预冻8h后，开始抽真空，并升温至-34℃，保持10h；升温至-25℃，保持8h；升温至-15℃，保持6h；升温至0℃，保持4h；升温至10℃，保持2h；升温至20℃，保持2h；升温至30℃，保持2h。
实验2组
实验3组
结果表明，五味子挥发油对制剂的成型性有很大影响。
综上所述，为确保制剂的质量和安全有效，本发明未保留五味子挥发油类成分。
(2)多糖提取实验1组注射液1(提取红参多糖)实验2组注射液2(提取五味子多糖)实验3组注射液3(提取麦冬、红参、五味子多糖)实验4组本发明工艺制备的注射液(提取麦冬多糖)实验5组注射液4(未提取多糖)(1)试验物品和试剂 本发明粉针剂试验前加少许蒸馏水后稍加热(40℃左右)待其溶化后再用1％羧甲基纤维素钠稀释成混悬液备用；大肠杆菌内毒素标准品；动物昆明种小白鼠，体重22～24g，♂♀各半，试验前饲养观察一周。
①对小白鼠常压耐缺氧存活时间的影响 小鼠120只随机分6组。对照组腹腔注射等容量生理盐水，给药组按临床用量1/20剂量腹腔注射，15分钟后将动物放于125ml广口磨口瓶内(瓶内置25g钠石灰，并以滤纸覆盖)，每瓶一只，立即以凡士林封闭，计时，记录自小白鼠投入后至死亡的时间，结果见表。
对小白鼠常压耐缺氧存活时间的影响(x±s)组别 动物数(只)剂量(g/kg)缺氧存活时间(min)空白对照 20- 10.3±1.7实验1组204.0 11.1±2.0实验2组204.0 12.5±1.3实验3组204.0 16.6±1.1实验4组204.0 16.7±2.0实验5组204.0 10.1±2.3②对小白鼠游泳疲劳时间的影响 小鼠120只随机分6组。实验前同法预先给药3天，实验当日再给药一次后30分钟，于小白鼠尾根部负2g的重物，将小白鼠放入80×60×40cm水池内，水深25cm，水温20±1℃，每次各组放一只，观察小白鼠头部沉入水中10秒钟不能浮出水面者的游泳时间，结果见表。
对小白鼠游泳时间的影响(x±s)组别 剂量(g/kg)动物数(只)小白鼠游泳时间(min)空白对照 - 20 6.15±3.14实验1组4.0 20 6.46±1.78实验2组4.0 20 7.05±1.29实验3组4.0 20 8.47±1.24实验4组4.0 20 8.48±2.13实验5组4.0 20 6.20±0.41③对小鼠耐寒冷的影响 小鼠120，按体重随机分为6组；给药组分别用三种生脉液临床用量的1/20量腹腔注射给药，对照组腹腔注射等容器生理盐水，30分钟后将各组小鼠混装于铁笼中，置于11～12℃的室外寒冷环境中，直至对照组小鼠死亡半数时，记录各组的死亡数。
组别 剂量(g/kg)动物数(只)死亡数对照组 等容量N.S.2013实验1组4.0 2012实验2组4.0 2012实验3组4.0 206实验4组4.0 206实验5组4.0 2012结果表明，红参、五味子多糖药理作用不明显，含有麦冬多糖的产品具有明显的药理活性，麦冬多糖是主要的起效成分。
附样品制备方法红参多糖制备将3120g红参切片，用8倍量85％的乙醇回流4次，每次2小时，药渣加8倍量的水提取3次，每次40min，滤过，滤液浓缩至1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，将两次醇沉的沉淀合并，加入350ml注射用水溶解，4℃冷藏，滤过即得红参多糖提取液。
五味子多糖制备五味子3120g加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，将两次醇沉的沉淀合并，加入350ml注射用水溶解，4℃冷藏，滤过即得五味子多糖提取液。
麦冬多糖制备麦冬3120g加8倍量的水提取3次，每次40min，滤过，滤液浓缩至1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过将两次醇沉的沉淀合并，加入350ml注射用水溶解，4℃冷藏，滤过即得麦冬多糖提取液。
混合多糖的制备将上述红参多糖、麦冬多糖和五味子多糖按1∶3.12∶1.56的比例混合即得混合多糖。
(2)成型工艺取含生药2.84g/ml的药液，分别与支架剂甘露醇、葡萄糖和乳糖进行混合，0.22μm滤膜过滤后冷冻干燥，每支西林瓶装溶液2ml。冻干机Edwards SNL-3200冷冻干燥机(美国热电Thermo)。冻干条件-40℃，预冻8h后，开始抽真空，并升温至-34℃，保持10h；升温至-25℃，保持8h；升温至-15℃，保持6h；升温至0℃，保持4h；升温至10℃，保持2h；升温至20℃，保持2h；升温至30℃，保持2h。
实验3组
实验4组
结果表明，含有红参、麦冬、五味子多糖的制剂很难成型，只含有麦冬多糖的实验4组样品成型性很好，满足注射剂的要求。
综上，本发明只保留了麦冬药材中的多糖类成分，未对红参、五味子药材中的多糖类成份进行针对性提取。
(3)麦冬提取物工艺实验1组麦冬药材加8倍量的水提取3次，每次40min，滤过，滤液浓缩至1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，4℃静置12小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，搅拌均匀，4℃静置过夜，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为1％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物1。
实验2组麦冬药材加8倍量的水提取3次，每次40min，滤过，滤液浓缩至1.05～1.10，即得麦冬提取物2。
实验3组取麦冬药材水提醇沉后的沉淀加15倍量蒸馏水，滤过，超滤，截留分子量6000-100000的多糖。
试验物品和试剂 本发明粉针剂试验前加少许蒸馏水后稍加热(40℃左右)待其溶化后再用1％羧甲基纤维素钠稀释成混悬液备用；大肠杆菌内毒素标准品；动物昆明种小白鼠，体重22～24g，♂♀各半，试验前饲养观察一周。
①对小白鼠常压耐缺氧存活时间的影响 小鼠120只随机分6组。对照组腹腔注射等容量生理盐水，给药组按临床用量1/20剂量腹腔注射，15分钟后将动物放于125ml广口磨口瓶内(瓶内置25g钠石灰，并以滤纸覆盖)，每瓶一只，立即以凡士林封闭，计时，记录自小白鼠投入后至死亡的时间，结果见表。
对小白鼠常压耐缺氧存活时间的影响(x±s)组别 动物数(只)剂量(g/kg)缺氧存活时间(min)空白对照 20- 10.3±1.7实验1组204.0 16.7±2.1实验2组204.0 14.3±1.2实验3组204.0 15.0±1.21②对小白鼠游泳疲劳时间的影响 小鼠120只随机分6组。实验前同法预先给药3天，实验当日再给药一次后30分钟，于小白鼠尾根部负2g的重物，将小白鼠放入80×60×40cm水池内，水深25cm，水温20±1℃，每次各组放一只，观察小白鼠头部沉入水中10秒钟不能浮出水面者的游泳时间，结果见表。
对小白鼠游泳时间的影响(x±s)组别 剂量(g/kg)动物数(只)小白鼠游泳时间(min)空白对照 - 20 6.15±3.14实验1组4.0 20 8.46±1.34实验2组4.0 20 7.87±1.23实验3组4.0 20 8.01±1.12③对小鼠耐寒冷的影响 小鼠120，按体重随机分为6组；给药组分别用三种生脉液临床用量的1/20量腹腔注射给药，对照组腹腔<p>表2 对大鼠由蛋清所致足跖肿胀的影响
给药组与空白对照组比较，*P＜0.01；与阳性对照组比较，△P＜0.05以上结果表明，本注射液对二甲苯诱导小鼠耳壳急性炎症有较强的抑制作用；对蛋清引起的大鼠足跖炎症，在不同时间的肿胀度也均有很强的抑制作用，且优于对照药。
1.3对棉球肉芽组织增生的影响取体重140-170g大鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，乙醚麻醉后给大鼠鼠蹊部各包埋20mg无菌棉球一个制作肉芽组织增生模型。各组按体表面积计算大鼠的用药量观察对棉球肉芽组织增生的影响。1组予本注射液5.2ml/kg，2组予本注射液2.6ml/kg，3组注射0.5％地塞米松磷酸钠0.005ml/kg，4组给等量生理盐水，均腹腔注射连续给药7天，于第8天处死大鼠，分离肉芽组织，置80℃烤箱中干燥5小时后称重。结果，1、2、3组均能抑制棉球肉芽组织增生，见表3。
表3 本注射液对大鼠肉芽组织增生的影响
2、抑菌试验2.1制造阳性疮疡及急性腹膜炎病理模型将12只家兔随机分为实验组和对照组。在每只家兔左侧同一部位剪毛、剃毛，用手术刀切约1cm长小口，深及皮下，从伤口向内注入5亿个/kg金黄色葡萄球菌，形成阳性疮疡；同时，给每只兔腹腔注射接种大肠杆茵K8830亿个/kg，造成急性腹膜炎症模型。实验组提前3天采用耳静脉注射本注射液，每只兔按10ml/kg·次，每天早晚各1次，共给药8天，结束前24小时停止给药；对照组不给任何药物，比较各组差异。
本注射液对家兔接种金色葡萄球菌形成阳性疮疡的试验结果如表4。接种3天后，对<p>将红参切片，用8倍量85％的乙醇回流4次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度60℃时1.10～1.15，加水至200ml，搅匀，4℃冷藏，滤过。滤液按体积加入0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得红参提取物；麦冬加8倍量的水提取3次，每次40分钟，滤过，滤液浓缩至60℃时1.0～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水，搅匀，4℃冷藏滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，4℃冷藏，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，按体积加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得麦冬提取物；取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，即得五味子提取物；取红参提取物、五味子提取物、麦冬提取物，混匀，滤过，以常规的方法制成注射液，一日一次，一次一支。
本发明的实施例2红参110份、麦冬330份和五味子165份将红参切片，用8倍量85％的乙醇回流4次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度60℃时1.10～1.15，加水至200ml，搅匀，4℃冷藏，滤过。滤液按体积加入0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得红参提取物；麦冬加8倍量的水提取3次，每次40分钟，滤过，滤液浓缩至60℃时1.0～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水，搅匀，4℃冷藏滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，4℃冷藏，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，按体积加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得麦冬提取物；取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，即得五味子提取物；取红参提取物、五味子提取物、麦冬提取物，混匀，滤过，以常规的方法制成葡萄糖静脉输液。
本发明的实施例3红参100份、麦冬300份和五味子150份将红参切片，用8倍量85％的乙醇回流4次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度60℃时1.10～1.15，加水至200ml，搅匀，4℃冷藏，滤过。滤液按体积加入0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得红参提取物；麦冬药材加8倍量的水提取3次，每次40min，滤过，滤液浓缩至1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，4℃静置12小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，搅拌均匀，4℃静置过夜，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为1％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物；取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，即得五味子提取物；取红参提取物、五味子提取物、麦冬提取物，混匀，滤过，以常规的方法制成氯化钠静脉输液。
本发明的实施例4红参110份、麦冬330份和五味子165份将红参切片，用8倍量85％的乙醇回流4次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度60℃时1.10～1.15，加水至200ml，搅匀，4℃冷藏，滤过。滤液按体积加入0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得红参提取物；麦冬加8倍量的水提取3次，每次40分钟，滤过，滤液浓缩至60℃时1.0～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水，搅匀，4℃冷藏滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，4℃冷藏，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，按体积加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得麦冬提取物；取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，即得五味子提取物；取红参提取物、五味子提取物、麦冬提取物，混匀，滤过，以常规的方法制成注射用浓溶液。
本发明的实施例5红参110份、麦冬330份和五味子165份将红参切片，用8倍量85％的乙醇回流4次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度60℃时1.10～1.15，加水至200ml，搅匀，4℃冷藏，滤过。滤液按体积加入0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得红参提取物；麦冬加8倍量的水提取3次，每次40分钟，滤过，滤液浓缩至60℃时1.0～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水，搅匀，4℃冷藏滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，4℃冷藏，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，按体积加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得麦冬提取物；取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，即得五味子提取物；取红参提取物、五味子提取物、麦冬提取物，混匀，滤过，以常规的方法制成粉针。
本发明的实施例6红参110份、麦冬330份和五味子165份将红参药材切片，用10倍量80％的乙醇回流3次，每次1.5小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10~1.15，所得稠膏加2倍注射用水，搅匀，4℃静置20小时，滤过，浓缩得红参提取物，五味子提取物的制备方法是，取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过；取麦冬药材，加10倍量的水提取4次，每次90min，滤过，滤液浓缩至相对对密度为1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，8℃静置6小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入4倍量注射用水溶解，8℃静置6小时，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为0.1-3％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物，三种提取物混合，按常规方法制备注射液，经检测麦冬多糖含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的5％。
本发明的实施例7红参110份、麦冬330份和五味子165份将红参药材切片，用5倍量60％的乙醇回流1次，每次0.5小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10~1.15，所得稠膏加1倍注射用水，搅匀，6℃静置6小时，滤过，浓缩得红参提取物；五味子提取物的制备方法是，取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过；取麦冬药材，加8倍量的水提取3次，每次70min，滤过，滤液浓缩至相对对密度为1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，6℃静置10小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入3倍量注射用水溶解，6℃静置8小时，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为0.1-3％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物，按常规方法制备粉针，其中麦冬多糖含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的23％，皂苷类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的2％，制剂中的麦冬多糖含量、皂苷类成分的含量之和占制剂中扣除辅料量和水分量后总固体量的25％。
本发明的实施例8红参100份、麦冬280份和五味子145份将红参药材切片，用10倍量85％的乙醇回流5次，每次2.5小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10~1.15，所得稠膏加4倍注射用水，搅匀，6℃静置20小时，滤过，浓缩得红参提取物，五味子提取物的制备方法是，取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10~1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过；取麦冬药材，加6倍量的水提取2次，每次50min，滤过，滤液浓缩至相对对密度为1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，3℃静置12小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入3倍量注射用水溶解，4℃静置10小时，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为0.1-3％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物，按常规方法制备葡萄糖输液剂，其中麦冬多糖含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的30％，皂苷类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的30％，，制剂中的麦冬多糖含量、皂苷类成分的含量之和占制剂中扣除辅料量和水分量后总固体量的60％。
本发明的实施例9红参90份、麦冬270份和五味子135份将红参药材切片，用10倍量80％的乙醇回流3次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10~1.15，所得稠膏加3倍注射用水，搅匀，6℃静置12小时，滤过，浓缩得红参提取物，五味子提取物的制备方法是，取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10~1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过；取麦冬药材，加6倍量的水提取2次，每次30min，滤过，滤液浓缩至相对对密度为1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，3℃静置15小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，2℃静置15小时，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为0.1-3％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物，按常规方法制备氯化钠输液剂，其中麦冬多糖含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的60％，皂苷类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的20％，，制剂中的麦冬多糖含量、皂苷类成分的含量之和占制剂中扣除辅料量和水分量后总固体量的80％。
本发明的实施例10红参90份、麦冬270份和五味子135份将红参药材切片，用10倍量80％的乙醇回流3次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10~1.15，所得稠膏加3倍注射用水，搅匀，6℃静置12小时，滤过，浓缩得红参提取物，五味子提取物的制备方法是，取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过；取麦冬药材，加5倍量的水提取2次，每次20min，滤过，滤液浓缩至相对对密度为1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，2℃静置20小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入1倍量注射用水溶解，2℃静置20小时，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为0.1-3％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物，按常规方法制备注射用浓溶液，其中麦冬多糖含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的80％。
本发明的实施例11红参90份、麦冬270份和五味子135份将红参药材切片，用8倍量70％的乙醇回流2次，每次1.5小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10~1.15，所得稠膏加2倍注射用水，搅匀，6℃静置8小时，滤过，浓缩得红参提取物，五味子提取物的制备方法是，取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过；取麦冬药材，加5倍量的水提取1次，每次20min，滤过，滤液浓缩至相对对密度为1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，2℃静置20小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入1倍量注射用水溶解，2℃静置20小时，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为0.1-3％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物按常规方法制备冻干粉针，其中麦冬多糖含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的90％。
权利要求
1.一种生脉注射制剂，它是由红参90-110重量份、麦冬270-330重量份和五味子135-165重量份及适当的辅料制备成的，注射剂中可测成分占总固体量大于25％；其特征在于以重量百分比计算所述注射制剂含有多种糖类成分、皂苷类成分，其中糖类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的5％-90％，制剂中不单独提取五味子挥发油类成分。
2.按照权利要求1所述的生脉注射制剂，其特征在于制剂中的糖类成分包含有单糖和多糖，以重量百分比计算其中的多糖含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的5％-80％。
3.按照权利要求1或2所述的生脉注射制剂，其特征在于制剂中的多糖类成分以麦冬多糖为主，按重量百分比计算其麦冬多糖的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的5％-60％。
4.按照权利要求1、2或3所述的生脉注射制剂，其特征在于制剂中的麦冬多糖含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的15％-50％，皂苷类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的2％-30％。
5.按照权利要求4所述的生脉注射制剂，其特征在于制剂中的麦冬多糖含量，皂苷类成分的含量二者之和占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量为25％--80％。
6.如权利要求1-5任意一项所述的生脉注射制剂的制备方法，其特征在于取红参提取物、五味子提取物、麦冬提取物，混匀，滤过，以常规的方法制成注射液、葡萄糖静脉输液、氯化钠静脉输液、注射用浓溶液、粉针或冻干粉针。
7.按照权利要求6所述的生脉注射制剂的制备方法，其特征在于红参提取物的制备方法采用常规的乙醇回流法提取，五味子提取物的制备方法是，取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，该工艺未提取五味子药材中的挥发油类成分；麦冬提取物的制备方法是取麦冬药材，水煮醇沉后滤过，滤液回收乙醇后加水搅匀，静置，滤过，得滤液A，将醇沉的沉淀加水溶解，静置，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入活性炭处理，滤过，该工艺提取了麦冬药材中的多糖类成分。
8.按照权利要求7所述的生脉注射制剂的制备方法，其特征在于取麦冬药材，加5～10倍量的水提取1～4次，每次20～90min，滤过，滤液浓缩至相对对密度为1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，2～8℃静置6～20小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入1～4倍量注射用水溶解，2～8℃静置6～20小时，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为0.1-3％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物。
9.按照权利要求8所述的生脉注射制剂的制备方法，其特征在于麦冬药材加8倍量的水提取3次，每次40min，滤过，滤液浓缩至1.05～1.10，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.10～1.15，加水，搅匀，4℃静置12小时，滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，搅拌均匀，4℃静置过夜，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，加入重量体积比为1％的活性炭处理，滤过，即得麦冬提取物。
10.按照权利要求6所述的生脉注射制剂的制备方法，其特征在于将红参切片，用8倍量85％的乙醇回流4次，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度60℃时1.10～1.15，加水至200ml，搅匀，4℃冷藏，滤过。滤液按体积加入0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得红参提取物；麦冬加8倍量的水提取3次，每次40分钟，滤过，滤液浓缩至60℃时1.0～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水，搅匀，4℃冷藏滤过，得滤液A，将两次醇沉的沉淀合并，加入2倍量注射用水溶解，4℃冷藏，滤过，得滤液B，将滤液A和B合并，按体积加入1％的活性炭，煮沸，保持微沸30分钟，稍冷滤过，得麦冬提取物；取五味子药材加6倍量的水提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.10～1.15，加入95％乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至相对密度1.10～1.15，加水搅匀，4℃静置，滤过，滤液加入重量体积比为0.4％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，即得五味子提取物；取红参提取物、五味子提取物、麦冬提取物，混匀，滤过，以常规的方法制成注射液、葡萄糖静脉输液、氯化钠静脉输液、注射用浓溶液、粉针或冻干粉针。
全文摘要
本发明是一种生脉注射制剂及其制备方法，它由红参、麦冬、五味子加适量辅料制备而成；所得产品含有多种糖类成分、皂苷类成分，其中糖类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的5％－90％，制剂中不单独提取五味子挥发油类成分，皂苷类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的2％－30％，产品具有益气养阴、复脉固脱的功效，是一种用于气阴两亏，脉虚欲脱的心悸、气虚、四肢厥冷及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克的注射剂，剂量准确，外观优良；稳定性好，安全性高，疗效显著，与现有技术相比，本发明工艺更加合理可行、制剂可靠有效，产品生产成本低廉。
文档编号A61P3/10GK1733209SQ20051008837
公开日2006年2月15日 申请日期2005年8月4日 优先权日2004年8月5日
发明者于文勇 申请人:贵阳云岩西创药物科技开发有限公司
文档序号 :
【 821252 】
技术研发人员：于文勇
技术所有人：贵阳云岩西创药物科技开发有限公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
技术研发人员：于文勇
技术所有人：贵阳云岩西创药物科技开发有限公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除