从银杏叶中提取银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸的工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种从银杏叶中提取物的エ艺，尤其涉及ー种从银杏叶中提取银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸的エ艺。
背景技术：
银杏科植物银杏(6 / 知'Oか7ο如)是我国的特有树种，银杏叶中含有黄酮类(大约20余种)、萜类、酚类、有益微量元素和17种氨基酸等有效成分。目前银杏叶提取物在美、日、德、意、韩等国家已经开发成药品、保健品和化妆品，我国也掀起了对银杏开发和研究的热潮。国内已有数百厂家生产银杏干浸膏，并相继有银杏叶制品投入市场。
银杏叶提取物罕有大量的银杏黄酮和银杏内酯等物质，它能够增加脑血管流量，改善脑血管循环功能，保护脑细胞，扩张冠状动脉，防止心绞痛及心肌梗塞，防止血栓形成，提高机体免疫能力。对冠心病、心绞痛、脑动脉硬化、老年性痴呆、高血压病人均十分有益。传统的提取过程中，溶剂在加热的条件下容易或者更快的进入细胞，但可溶性物质在热的条件溶解度更高，先后被溶解而出现很高的渗透压，造成提取率低，活性成分低，而且エ艺繁琐，生产周期长。
发明内容
为了克服上述缺陷，本发明提供一种有效、高速的从银杏叶中提取银杏黄酮和银杏内酷等提取物的エ艺。本发明为了解决其技术问题所采用的技术方案是一种从银杏叶中提取银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸的エ艺，以银杏叶为原料，其エ艺步骤包括
(1)对银杏叶进行前期处理将干银杏叶风干后粉碎至粉末状；
(2)通过超声波提取，将原料与提取溶媒以I:10(g/mL)的料液比充分混合后，在70ΚΗζ频率，25°C的温度下对料液进行提取25分钟，提取f 2次，每次提取的时间为25分钟，提取后过滤、合并滤液；
(3)减压浓缩将步骤(2)中的提取液放入旋转蒸发仪中减压浓缩，温度控制45飞5°C，真空度控制在O. IMPa，浓缩体积至原有体积的1/10 ；
(4)进入大孔树脂处理将步骤(3)中浓缩后的提取液过滤后，直接进入大孔树脂进行处理；
(5)收集洗脱液收集从大孔树脂柱中的流出液和经过由低到高浓度醇水溶液洗脱的洗脱液；
(6)减压浓缩将步骤(5)中的洗脱液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/10；
(7)检测提取物用高效液相色谱法(HPLC)检测提取物中的银杏黄酮、银杏内酯和酚酸的含量，其中检测银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸含量的方法分别为银杏黄酮的检测方法为流动相甲醇磷酸水=57:0. 2:42. 8，流速为I. Oml/min，检测波长为370nm，色谱柱温25°C，进样量20μ ;银杏内酯的检测方法为流动相为甲醇水=25:75，流速LOmL/min，检测器为ELSD ;银杏酚酸检测方法为甲醇水=90:10，流速为I. OmL/min，检测波长为 3IOnm ；
(8 )将经上述步骤提取的提取物进行干燥储存，至此整个エ艺步骤完成。作为本发明的进ー步改进，所述步骤(2)中提取溶媒为水或者低碳醇。作为本发明的进ー步改进，所述低碳醇为甲醇或者こ醇，所述低碳醇的体积浓度为 75%。本发明的有益效果是本发明通过超声波的方法来进行溶媒提取，不但起到了搅拌和辅助加热的作用，更重要的是超声波在提取溶媒中产生的“空化效应”和机械作用一方面可有效地破碎药材的细胞壁，使有效成分呈游离状态并溶入提取溶媒中，另ー方面可加速提取溶媒的分子运动，使得提取溶媒和药材中的有效成分快速接触，相互溶合、混合，使样品介质内各点受到的作用一致，使整个样品萃取更均匀，加速植物有效成份的浸出提取，提高提取率，使得提取物中银杏黄酮和银杏内酯含量高、避免了活·性成分的损失，简化了生产エ艺，缩短了生产周期，同时经过处理后的银杏酚酸的含量大大降低了。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进ー步详述。实施例I
(1)对银杏叶进行前期处理将干银杏叶风干后粉碎至粉末；
(2)将原料与水按1:10比例放入提取罐中，利用超声波进行提取，超声波提取的超声工作频率为70KHZ，提取时间25分钟，过滤，补加水至原体积，继续超声提取25分钟，过滤，合并滤液；
(3)减压浓缩将提取液放入旋转蒸发仪中减压浓缩，温度控制55°C，真空度控制在
0.IMPa，浓缩体积至原有体积的1/10 ；
(4)进入大孔树脂处理将步骤(3)中浓缩后的提取液过滤后，直接进入大孔树脂进行处理；
(5)收集洗脱液收集从大孔树脂柱中的流出液和经过由低到高浓度醇水溶液洗脱的洗脱液；
(6)减压浓缩将步骤(5)中的洗脱液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/10；
(7)用高效液相色谱法(HPLC)检测提取物中银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸含量的方法分别为银杏黄酮的检测方法为流动相甲醇磷酸水=57:0. 2:42. 8，流速为
1.Oml/min，检测波长为370nm，色谱柱温25°C，进样量20μ ;银杏内酯的检测方法为流动相为甲醇7jC =25: 75，流速I. OmL/min,检测器为ELSD ;银杏酚酸检测方法为甲醇水=90:10，流速为I. OmL/min，检测波长为31Onm ；
(8 )将经上述步骤提取的提取物进行干燥储存，至此整个エ艺步骤完成。实施例2
(1)对银杏叶进行前期处理将干银杏叶风干后粉碎至粉末状；
(2)超声提取，将原料与体积浓度为75%的甲醇按1:10比例放入提取罐中，利用超声波进行提取，超声波提取的超声工作频率为70KHz，25°C下提取时间25分钟，过滤，补加甲醇至原体积，继续超声提取25分钟，过滤，合并滤液；(3)减压浓縮将提取液放入旋转蒸发仪中减压浓缩，温度控制45°C，真空度控制在
0.IMPa，浓缩体积至原有体积的1/8 ；
(4)进入大孔树脂处理将步骤(3)中浓缩后的提取液过滤后，直接进入大孔树脂进行处理；
(5)收集洗脱液收集从大孔树脂柱中的流出液和经过由低到高浓度醇水溶液洗脱的洗脱液；
(6)减压浓缩将步骤(5)中的洗脱液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/10；
(7)用高效液相色谱法(HPLC)检测提取物中银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸含量的方法分别为银杏黄酮的检测方法为流动相甲醇磷酸水=57:0. 2:42. 8，流速为
1.Oml/min，检测波长为370nm，色谱柱温25°C，进样量20μ ;银杏内酯的检测方法为流动相为甲醇水=25: 75，流速I. OmL/min,检测器为ELSD ;银杏酚酸检测方法为甲醇水=90:10，流速为I. OmL/min，检测波长为310nm ；
(8 )将经上述步骤提取的提取物进行干燥储存，至此整个エ艺步骤完成。实施例3
(1)对银杏叶进行前期处理将干银杏叶风干后粉碎至粉末；
(2)超声提取，将原料与体积浓度为75%的こ醇按1:10比例放入提取罐中，利用超声波进行提取，超声波提取的超声工作频率为70KHz，25°C下提取时间25分钟，过滤，补加こ醇至原体积，继续超声提取25分钟，过滤，合并滤液；
(3)减压浓缩将提取液放入旋转蒸发仪中减压浓缩，温度控制50°C，真空度控制在
0.IMPa，浓缩体积至原有体积的1/10 ；
(4)进入大孔树脂处理将步骤(3)中浓缩后的提取液过滤后，直接进入大孔树脂进行处理；
(5)收集洗脱液收集从大孔树脂柱中的流出液和经过由低到高浓度醇水溶液洗脱的洗脱液；
(6)减压浓缩将步骤(5)中的洗脱液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/10；
(7)用高效液相色谱法(HPLC)检测提取物中银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸含量的方法分别为银杏黄酮的检测方法为流动相甲醇磷酸水=57:0. 2:42. 8，流速为
1.Oml/min，检测波长为370nm，色谱柱温25°C，进样量20μ ;银杏内酯的检测方法为流动相为甲醇水=25: 75，流速I. OmL/min,检测器为ELSD ;银杏酚酸检测方法为甲醇水=90:10，流速为I. OmL/min，检测波长为310nm ;
(8 )将经上述步骤提取的提取物进行干燥储存，至此整个エ艺步骤完成。经过上述的实施例的实现，通过本发明提供的方法获取的银杏提取物有效成分含量高，按高效液相色谱法(HPLC)测定提取物中银杏黄酮的含量为25 30%，比传统的热提取 提高5 10%，同时提取物中的银杏内酯也提高到了 8 12%。，时提取物经过处理后银杏酸的含量比传统提取方法下降了 O. 002(Γ0. 0030%，含量达到了 O. 001(Γ0. 0015%。本发明发得到的银杏叶提取物银杏黄酮和银杏内酯含量高、避免了活性成分的损失，简化了生产エ艺，缩短了生产周期。
权利要求
1.一种从银杏叶中提取银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸的工艺，其特征在于以干银杏叶为原料，其工艺步骤包括 (1)对银杏叶进行前期处理将干银杏叶进行粉碎至粉末状； (2)通过超声波提取，将原料与提取溶媒以I:10(g/mL)的料液比充分混合后，在70KHz频率，250C的温度下对料液进行，提取f 2次，每次提取的时间为25分钟，提取后过滤、合并滤液； (3)减压浓缩将步骤(2)中的提取液放入旋转蒸发仪中减压浓缩，温度控制45飞5°C，真空度控制在O. IMPa，浓缩体积至原有体积的1/10 ； (4)进入大孔树脂处理将步骤(3)中浓缩后的提取液过滤后，直接进入大孔树脂进行处理； (5)收集洗脱液收集从大孔树脂柱中的流出液和经过由低到高浓度醇水溶液洗脱的 洗脱液； (6)减压浓缩将步骤(5)中的洗脱液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/10； (7)检测提取物用高效液相色谱法(HPLC)检测提取物中的银杏黄酮、银杏内酯和酚酸的含量，其中检测银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸含量的方法分别为银杏黄酮的检测方法为流动相甲醇磷酸水=57:0. 2:42. 8，流速为I. Oml/min，检测波长为370nm，色谱柱温25°C，进样量20μ ;银杏内酯的检测方法为流动相为甲醇水=25:75，流速LOmL/min，检测器为ELSD ;银杏酚酸检测方法为甲醇水=90:10，流速为I. OmL/min，检测波长为 3IOnm ； (8 )将经上述步骤提取的提取物进行干燥储存，至此整个工艺步骤完成。
2.根据权利要求I所述的从银杏叶中提取银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸的工艺，其特征在于所述步骤(2)中提取溶媒为水或者低碳醇。
3.根据权利要求2所述的从银杏叶中提取银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸的工艺，其特征在于所述低碳醇为甲醇或者乙醇，所述低碳醇的体积浓度为75%。
全文摘要
本发明公开了一种从银杏叶中提取银杏黄酮、银杏内酯和银杏酚酸的工艺，其步骤包括(1)对银杏叶进行前期处理；(2)进行超声波装置提取；(3)减压浓缩；(4)进入大孔树脂处理；(5)收集洗脱液；(6)减压浓缩；(7)检测提取物；(8)将经上述步骤提取的提取物进行干燥储存。通过本发明得到的提取物中银杏黄酮和银杏内酯含量高、避免了活性成分的损失，简化了生产工艺，缩短了生产周期，同时经过处理后的银杏酚酸的含量大大降低了。
文档编号A61P9/12GK102727538SQ20121015267
公开日2012年10月17日 申请日期2012年5月17日 优先权日2012年5月17日
发明者张艳侠, 王凤越 申请人:江苏颐海药业有限责任公司
文档序号 :
【 810028 】
技术研发人员：王凤越,张艳侠
技术所有人：江苏颐海药业有限责任公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
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