一种生物法利用海蓬子制备石斑鱼免疫增强剂的方法与流程

1.一种生物法利用海蓬子制备的石斑鱼用免疫增强剂，其特征在于由以下质量比的原料制成：海蓬子粉30～50份、山药粉15～20份、杜仲8～12份、绞股蓝8～12份、神曲6～8份、金银花3～5份、川芎6～8份、甘草6～8份、白花蛇舌草3～5份、穿心莲5～7份、蓝莓3～5份。

2.根据权利要求1所述的一种生物法利用海蓬子制备的石斑鱼用免疫增强剂，其特征在于所述原料组成优选为：海蓬子粉40份、山药粉18份、杜仲10份、绞股蓝10份、神曲7份、金银花4份、川芎7份、甘草7份、白花蛇舌草4份、穿心莲6份、蓝莓4份。

3.根据权利要求1所述的一种生物法利用海蓬子制备的石斑鱼用免疫增强剂，其特征在于所述海蓬子粉预处理工艺如下：

（1）粉碎浸泡：将去除杂质的海蓬子茎杆粉碎，过100目筛，加入海蓬子质量比5%的海藻，然后加入2倍质量比纯净水浸泡3～5h；

（2）蒸煮：将浸泡后的海蓬子悬浮液蒸煮1～2h，然后在密封条件下降温至室温；

（3）分离：将蒸煮液进行固液分离，得海蓬子茎杆粉，分离后的水进入步骤（1）进行循环利用；

（4）自然腐熟：控制海蓬子茎杆粉含水量40～50%，控温30～50℃，自然腐熟30～50d；

（5）二步发酵酶解：自然腐熟结束后，加入海蓬子质量比2%的纤维素酶和1%的低聚木糖酶，并接种海蓬子质量比2～3%的耐盐嗜碱芽孢杆菌，在28～35℃条件下发酵3～5d，12小时搅拌一次；发酵结束后即得海蓬子发酵粉。

4.根据权利要求3所述的一种生物法利用海蓬子制备的石斑鱼用免疫增强剂，其特征在于所述海藻是浒苔、海带、马尾藻、鼠尾藻中的一种或几种的混合物。

5.根据权利要求1所述的一种生物法利用海蓬子制备的石斑鱼用免疫增强剂，其特征在于所述免疫增强剂按如下步骤制备：

（1）混合粉碎：将各原料按比例混合，然后粉碎过100目筛；加入原料质量3倍的纯净水；

（2）酶解：加入中草药原料质量比3～5%的纤维素酶、2～3%的低聚木糖酶，在40～60℃条件下控温酶解4～8h，每隔0.5h搅拌一次；

（3）过滤分离：过滤酶解液，得到酶解液和酶解残渣；

（4）超声波辅助浸提：向酶解残渣中加入3～5倍的纯净水，在超声波辅助作用下，100℃条件下回流浸提20～30min，超声功率400w，频率25kHz；超声功率400w，频率25kHz；

（5）过滤分离：过滤浸提液，得到浸提液和浸提残渣；

（6）发酵液制备：向步骤（5）中的浸提残渣中加入5倍质量比的纯净水，并加入残渣质量比3.0～5.0%葡萄糖、2.0～3.0%酵母膏、0.3～0.5%磷酸二氢钾、0.02%MgSO₄、0.01%CaCl₂，pH调至7.0～7.2；

（7）好氧发酵：选用液体发酵罐，装液量体积比为60～70%，接种地衣芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌，接种量分别为2～4%、1～2%，控制发酵温度28～37℃，转速150～300rpm；在此发酵条件下发酵12～24h；

（8）厌氧发酵：好氧发酵结束后，接种乳酸杆菌和两歧双歧杆菌，接种量均为2～4%，发酵温度28～37℃，控温厌氧发酵12～24h；

（9）合并：将步骤（3）中的酶解液、步骤（5）中的浸提液和步骤（8）中的发酵液合并；

（10）低温浓缩：在低温条件下将步骤（9）合并后的增强剂溶液进行浓缩；

（11）吸附干燥：浓缩后用1～1.5倍质量比的麸皮吸附，在40～60℃鼓风干燥机中干燥，水分控制在8～10%；

（12）粉碎：将干燥后的产品用粉碎机60目过筛粉碎，即得石斑鱼用免疫增强剂。