一种新型喹唑啉衍生物lu1506及其制备方法和应用
[0040] 对制备的化合物6进行ESI-MS Jh-NMR标准，结果如下：
[0041 ] ESI-MS(m/z): 509[M+H ] + ; 1H-NMlK300MHz，DMSO-Cl6，ppm): δ 10 · 70(s，1H)，9 · 23(s， 1Η)，8·29(s，lH)，7.79(s，lH)，7.28-7.25(d，J = 6.9Hz，2H)，7.21-7.18(d，J = 8.7Hz，2H)， 7.12(s，lH)，6.70-6.64(m，3H)，6·60-6.57(d，J = 8.7Hz，2H)，6·01-6.5.97(t，J = 5.7Hz， 1H)，4· 27-4· 22(t，J = 7 ·5Ηζ，2Η)，4· 14-4.12(d，J = 5.7Hz，2H)，3.92(s，3H)，3.20-3.17(t， J = 7.5Hz，2H)，2.85(s，6H).
[0042] 实验例7化合物6抗肿瘤细胞增殖活性评价。
[0043] (1)受试样品：
[0044]本发明的化合物6均用含0.1%DMS0的培养基配制成所需浓度。
[0045] (2)细胞株：
[0046] MCF-7 (人乳腺癌细胞，ATCC: HTB-22)、SK-BR-3 (人乳腺癌细胞，ATCC: HTB-30)、 HCTl 16(人结肠癌细胞，ATCC: CCL-247)、U-118MG(人脑星形胶质母细胞瘤，ATCC:HTB-15)、 U-87MG(人脑星形胶质母细胞瘤，ATCC: HTB-14)、MDA-MB-468 (人乳腺癌细胞，ATCC: HTB-132)6株肿瘤细胞均购自美国标准菌种收藏所(ATCC)。
[0047] (3)主要仪器及材料
[0048] 超纯水仪:MILLIPORE Direct-Q 3;
[0049] 高压灭菌锅:HVE-50，Hirayama公司；
[0050] 数显恒温水浴锅:HH-4,国华电器有限公司；
[0051 ]超净台:VS-1300-U洁净工作台，苏州安泰空气技术有限公司；
[0052] 细胞孵育箱:HF151UVC02培养箱，上海力申公司；
[0053]低温离心机:上海安亭科学仪器厂
[0054]酶标仪:ELx800, Biotek 公司
[0055]平板振荡器:ZD-9556，太仓市科教器材厂；
[0056] 96孔细胞培养板、25cm2培养瓶:Corning Costar公司；
[0057] 2mL冻存管：Corning Costar公司；
[0058] (4)主要试剂
[0059] RPMI-1640培养基:Gibco 公司；
[0060] DMEM 培养基:Gibco公司；
[0061] McCoy's 5A培养基:Gibco公司；
[0062] L-15 培养基:Gibco 公司；
[0063] MEM 培养基:Gibco公司；
[0064] PBS 缓冲液:Gibco 公司；
[0065] 胎牛血清:Gibco公司；
[0066] 0.25% 胰酶溶液:Hyclone 公司；
[0067] MTT(四噻唑蓝）：Sigma公司，溶于I3BS溶液中，制成5mg/mL的溶液，过滤除菌后使 用，避光保存；
[0068]阿霉素(ADR):北京华丰联合技术有限公司。
[0069] DMS0:二甲基亚楓，Sigma 公司；
[0070] (5)试验方法
[0071] ]^^-7、1]-1181?；细胞选用01^]1培养基，1]-87]^细胞选用腿]1培养基，]?^-]?-468细 胞选用1-15培养基，!1(：1'116细胞选用1(：〇 7'854培养基，其他细胞选用1?^1-1640培养基。 培养基中均含10%灭火的胎牛血清和80U · ml/1青霉素和0.08mg · ml/1链霉素。
[0072] 将生长状态良好、处于对数生长期的MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-468、U-118MG、 此1116、1]-87]^细胞按1104个/1^的密度接种于96孔板，每孔10(^1。置于37°(3、5%〇) 2培养 箱中培养12小时待贴壁。加药细胞孔按预设的浓度梯度加入待测、经灭菌处理的溶于培养 基的化合物6，每孔200μ1，空白细胞孔加入等体积的培养基，对照细胞孔按预设的浓度梯度 加入等体积溶于培养基的阿霉素(ADR)，平行6孔。在37°C、5 %⑶2培养箱中培养48小时后， 每孔加入1〇μ1浓度为5mg/mL的MTT溶液，继续置于37°C、5%C0 2培养箱中培养4小时。小心吸 出上清液，每孔加入150μ1 DMSO溶解紫色残留物（甲瓒），平板振荡10分钟使沉淀全部溶解， 于酶标仪上测定〇·D·值(吸光度），波长570nm〇
[0073] 按照公式"相对生存率=(D含药-D空白）/(D对照-D空白）X 100%"计算每一个样 品浓度下的样品对肿瘤细胞的抑制率。
[0074] 实验平行重复3次，以抑制率对化合物浓度作图，计算本发明化合物6的IC5〇(半数 有效抑制浓度)值。同时采用阿霉素(ADR)作为阳性对照药物。
[0075] (6)实验结果
[0076] 表1化合物6LU1506抗肿瘤细胞增殖活性（IC5Q土SDyM)
[0078]如表1所示，给出了化合物6抗肿瘤细胞增殖活性的测试结果，结果表明所制备的 新型喹唑啉衍生物对上述肿瘤细胞具有抑制作用，可用于制备抗肿瘤制剂。
【主权项】
1. 一种新型喹唑啉衍生物LU1506,其化学命名为N-{[(4-二甲氨基）苯基]甲基}-4-N-[7-甲氧基-6-(1-吡咯-2-基)羟乙基]喹唑啉_4基}苯_1，4_二胺，及该化合物的药学上可接 受的盐、溶剂化物或者药物前体或者立体异构体或者互变异构体或者代谢物。2. 权利要求1所述的新型喹唑啉衍生物LU1506的制备方法，其特征在于，包括如下步 骤： S1:在氮气保护下，将吡咯溶解于四氢呋喃，冰浴下缓慢滴加 EtMgBr乙醚溶液，搅拌30 分钟~2小时，反应液0~60°C搅拌30分钟~2小时，0~60°C加入溴乙酸甲酯搅拌30分钟~2 小时，生成化合物（1)，即2-( 1-吡咯-2-基）乙酸酯； S2:在氮气保护下，将化合物（1)溶解于四氢呋喃，冰浴下边搅拌边分批加入LiAlH430分 钟以上，得到还原产物化合物(2)，即2-(1-吡咯-2-基）乙醇； S3:在氮气保护下，将化合物(2)与4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-醇、PPh3溶解于四氢呋喃， 在冰浴下边搅拌边分批加入DTAD，反应6小时以上，生成化合物（3)，即4-氯-7-甲氧基-6-[2- (1 -吡咯-2-基)羟乙基]喹唑啉； S4:将4-氨基甲基-N，N-二甲基苯胺、1-氟-4-硝基苯和碳酸钠以DMSO溶解，60~120°C 搅拌反应4~12小时，生成化合物(4)，即N-[4-(4-二甲胺基)苯基]甲基-4-硝基苯胺； S5:将化合物(4)，以四氢呋喃溶解，加入雷尼镍，通入氢气，25~100°C搅拌3~12小时， 进生成化合物(5)，即N- {[ (4-二甲胺基)苯基]甲基}苯-1，4-二胺； S6:将化合物（3)和化合物（5)溶于正丁醇，60~120°C搅拌反应1~6小时，生成化合物 (6)，即N-{[(4-二甲氨基)苯基]甲基}-4-N-[7-甲氧基-6-(1-吡咯-2-基)羟乙基]喹唑啉-4 基}苯-1，4_二胺。3. 根据权利要求2所述的新型喹唑啉衍生物L U15 0 6的制备方法，其特征在于，步骤S1 中，EtMgBr乙醚溶液的浓度为3M，滴速为5~10ml/min，EtMgBr乙醚、溴乙酸甲酯、四氢呋喃、 吡咯的用量比为100~500mL:20~50g:250~10001111:20~5(^ ;步骤52中，1^41!14的用量为 每克化合物（1)加入〇 · 25~2g。4. 根据权利要求2所述的新型喹唑啉衍生物L U15 0 6的制备方法，其特征在于，步骤S 3 中，所述的DTAD分3~6批加入，间隔2~4小时/次，其中，4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-醇、PPh3、 DTAD、化合物(2)的摩尔用量比为1:1:1:0.8~1.4。5. 根据权利要求2所述的新型喹唑啉衍生物L U15 0 6的制备方法，其特征在于，步骤S 4 中，4-氨基甲基-N，N-二甲基苯胺、1-氟-4-硝基苯和碳酸钠的摩尔用量比为1:1:0.3~3。6. 根据权利要求2所述的新型喹唑啉衍生物L U15 0 6的制备方法，其特征在于，步骤S 5 中，雷尼镍的用量为每1克化合物(4)加入雷尼镍0.2~2.0g。7. 根据权利要求2所述的新型喹唑啉衍生物L U15 0 6的制备方法，其特征在于，步骤S 6 中，化合物(5)、化合物(3)的摩尔用量比为1:0.6~1.2。8. -种药物组合物，包括上述权利要求1中所述的化合物和药学上可接受的载体。9. 权利要求1所述的化合物，或者权利要求8所述的药物组合物在制备药剂中的用途。10. 权利要求1所述的新型喹唑啉衍生物LU1506或者该化合物的药学上可接受的盐、溶 剂化物或者药物前体或者立体异构体或者互变异构体或者代谢物在制备抗肿瘤剂中的应 用。11. 权利要求1所述的新型喹唑啉衍生物LU1506或者该化合物的药学上可接受的盐、溶 剂化物或者药物前体或者立体异构体或者互变异构体或者代谢物与一种或多种抗癌药剂 结合在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种新型喹唑啉衍生物LU1506及其制备方法，其化学命名为N-{[(4-二甲氨基)苯基]甲基}-4-N-[7-甲氧基-6-(2-吡咯烷基)羟乙基]喹唑啉-4基}苯-1，4-二胺。本发明的喹唑啉衍生物及其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物对MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-468、U-118？MG、HCT116、U-87？MG具有优秀的抗肿瘤体内外活性，在制备抗肿瘤药物上具有较好的应用前景。
【IPC分类】A61P35/00, C07D403/12
【公开号】CN105541807
【申请号】CN201510875745
【发明人】卢光明, 张卓立, 潘璟
【申请人】中国人民解放军南京军区南京总医院
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月3日
文档序号 :
【 9779315 】
技术研发人员：卢光明,张卓立,潘璟
技术所有人：中国人民解放军南京军区南京总医院
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
技术研发人员：卢光明,张卓立,潘璟
技术所有人：中国人民解放军南京军区南京总医院
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除